Стало известно, сколько зарабатывают ведущие шоу «Орел и решка»

В СМИ появилась информация о том, сколько на самом деле зарабатывают популярные ведущие телепроекта «Орел и решка». Сообщается, что за все сезоны умопомрачительных съемок ведущим удалось заработать не так уж и много.

Дело в том, что пик эйфории от проекта уже прошел, а телезрители захотели узнать, сколько же получают люди, которые бесплатно катаются по миру, видят невероятную красоту, живут наслаждаясь и при этом такие «беззаботные деньки» еще и оплачиваются.

На сегодняшний деть отснято уже 20 сезонов телепередачи, наверное, во всех уголках мира. Несмотря на привлекательность подобной работы ведущие часто менялись, вместе с уровнем дохода.

В сети можно найти открытую информацию об этом, однако стоит помнить и о том, что ведущие получали и премии, и надбавки, и командировочные и прочие выплаты, которые для простых обывателей остаются под замком неизвестности.

Орел и решка, фото: click-or-die.ru

Популярные статьи сейчас

Все новости

Так, Андрей Бедняков продержался на телепроекте больше всех — 5 сезонов, успев сменить 3-х партнерш. Средняя заработная плата у Беднякова была на уровне 4 000 долларов. Поэтому назвать ведущего обогатившимся за счет программы никак нельзя. Не далеко ушла и Регина Тодоренко, которая зарабатывала в месяц от 3-х до 5-ти тысяч долларов. Окончательная сумма выплаты зависела не только от Тодоренко — это и успешность программ или количество дней работы.

Настя Ивлеева стала «дублером» предыдущих сезонов, однако возвращение к уже посещенным ранее местам стало очень популярным среди телезрителей. Это приносило Ивлеевой порядка 7 000 долларов в месяц.

Леся Никитюк зарабатывала около 5 тысяч долларов, а вот Жанне Бадоевой доставалось больше всех — около 15 000 долларов. Однако такие деньги не смогли заставить ее остаться в проекте.

Акценты напоминают, что в сети показали 10 видов самого опасного древнего оружия: люди уже тогда обладали буйной фантазией.

Как ранее сообщал портал Акценты, в СМИ появилась информация о том, что китайцев заваривают в собственных квартирах и пачками пакует полиция: устрашающее видео.

Также портал Акценты писал о том, что физикам удалось раздобыть доказательства того, что Всемирный потоп все же был в реальности, и прояснить его причины.

Подписывайтесь на наш Twitter

Подписывайтесь на наш Instagram

Сколько зарабатывают ведущие «Орла и Решки»?

В подобном шоу можно сниматься и бесплатно 🔥

Популярная программа о путешествиях «Орел и Решка» разу понравилась многим зрителям, но со временем любовь зрителя сменилась на откровенное раздражение. Многие писали гневные комментарии о том, что ведущие катаются по миру бесплатно, неплохо зарабатывают, но при этом жалуются на то, что им очень сложно.

Зрители посмотрели 20 сезонов, во время которых ведущие посетили, наверное, все страны на Земле. Кстати, за все время шоу создатели много раз меняли ведущих. Сегодня мы расскажем о том, сколько ориентировочно зарабатывали самые известные звезды шоу Орел и Решка (информация взята с открытых источников в интернете).

Конечно, они получали дополнительно отпускные, премии, командировочные и, конечно же, деньги на золотой карте, но пока известно только об их ежемесячном заработке.

Андрей Бедняков

Этот ведущий сменил 3 партнеров по съемкам, продержавшись целых 5 сезонов. За это время он успел посетить около 60 стран, но его заработок, как ни странно, далеко не самый высокий. В среднем, ведущий получал порядка 4 тысяч долларов каждый месяц. Но после завершения участия в проекте он запустил свою передачу, так что главная ценность – это известность, а не деньги.

Регина Тодоренко

instagram.com/p/B6f0qDIBWrM/?utm_source=ig_embed&utm_campaign=loading» data-instgrm-version=»12″>

Регина также не смогла достигнуть рекордных заработков в программе. Согласно существующей информации, ведущая зарабатывала от 3 до 5 тысяч долларов в месяц, то есть, в среднем ее заработок не отличался от доходов Андрея Беднякова. Конкретная сумма зависела от количества съемочных дней и успешности выпусков.

Анастасия Ивлеева

 

Посмотреть эту публикацию в Instagram

 

Доброе утро, фрэндики!💛 Я в Москве уже 4 года и за это время моя аудитория выросла в цифру 12,8 млн человек 🙈 а встреча с подписчиками была всего однажды и то, какая то рваная. Так вот , друзья мои дорогие , я хочу видеть вас всех 1 ОКТЯБРЯ!! Приходите ВСЕ! С хорошим настроением и заряженным телефоном, ибо фоток будет много!🥰🐥 Встречаемся в «1930. MOSCOW » ! Это крытый концертный зал , так что нам будет тепло 🖤 Я решила что это фан встреча должна быть самой пизд@той!🎊Так что на входе вас будет встречать @slavagee с моднейшим музлом, а так же Коваль @koval_now с микрофоном , ибо все это пойдёт во ВЛОГ!🎤📹 Будут коктейли для взрослых и лимонад для маленьких:) 🍼🥂Более того, мы поставим тот самый разрисованный лифт из AGENTSHOW 2.0! Так что любой желающий сможет запилить фоточку с ним😍🥰 А так же, я лично продам 76 уникальнейших футболок которые мы сделали вместе с Куском @kys_nikita !😈 Короче, будет мега движ! Я ЖДУ ВАС ВСЕХ!!Наобнимаемсяяяяя🥰🥰🥰🥰 . СБОР – с 18:30 до 19:30📍 НАЧАЛО – 19:30 📍📍 АДРЕС – Москва, Партийный переулок, 1к6 (вход с ул. Дубининская, д. 70) «1930.MOSCOW» . ВХОД САМЫЙ СВОБОДНЫЙ В МИРЕ ДЛЯ ВСЕХ ЖЕЛАЮЩИХ @хуенно провести время СО МНОЙ!🖤 #GEMATOMA2019 #настяивлеева

Публикация от НАСТЯ ИВЛЕЕВА (@_agentgirl_) 23 Сен 2019 в 11:35 PDT

Анастасия участвовала в сезоне, когда команда программы посещала те же места, что и с другими ведущими ранее. Римейки выпусков почему-то стали очень популярными, а заодно принесли известность Анастасии. Успех и рейтинги положительно сказались на уровне заработка ведущей, который в среднем составил 7 тысяч долларов в месяц.

Леся Никитюк

А эта ведущая никогда не скрывала свои доходы. За время съемок в Орле и Решка она много раз пользовалась золотой картой и проходила испытания сотней долларов. Шоу подарило ведущей популярность, но ее заработок не поражает воображение. В среднем ее доход оставался на уровне 5 тысяч долларов.

Жанна Бадоева

А замыкает наш список лидер среди всех ведущих. Создательница шоу и любимица зрителей зарабатывала не менее 15 тысяч долларов в месяц. Но даже такие огромные гонорары не удержали Жанну. Она снялась в трех сезонах, а затем покинула проект.

Остальные ведущие не так понравились зрителям, поэтому их гонорары остались на достаточно низком уровне. Хотя мы уверены, что в подобном шоу можно сниматься бесплатно.

P.S. Делитесь этой записью с друзьями!

Наш инстаграм — @intrendru

Источник

Вконтакте

Facebook

Twitter

Google+

Одноклассники

Эпизод шоу «Орел и решка» впервые сняли на смартфон – Samsung Newsroom Россия

Samsung Electronics и телеканал «Пятница» представляют новый эпизод популярного шоу «Орёл и решка. Чудеса света», который впервые был снят на смартфон. Съемки проекта на устройства Samsung Galaxy Note20 длились пять дней. Команда использовала гаджеты чтобы запечатлеть самые живописные места Замбии: водопад Виктория, бассейн Дьявола на краю водопада, сафари в национальном парке “Моси Оа Тунья” с носорогами, жирафами, слонами и буйволами, рыбалку на тигровую рыбу в реке Замбези и уникальное кафе со слонами.

Проект стал для команды «Орла и решки» первым опытом съемки телепередачи на смартфон: до этого во всех выпусках шоу применялось только профессиональное оборудование.

Перед поездкой в Африку съемочная группа в течение месяца тестировала камеру Galaxy Note20 в разных условиях и убедилась, что смартфон отлично подходит для создания эпизода передачи для федерального телевидения. Чтобы по максимуму реализовать потенциал мобильного устройства, операторы использовали стэдикамы, насадки с дополнительной оптикой, поляризационные и нейтральные фильтры и даже спортивный FPV-дрон.

Как отметил режиссер проекта Иван Поляков, для бесперебойной работы в экстремально жарком климате команда «Орла и решки» использовала несколько смартфонов Galaxy Note20. Это дало возможность снимать несколько планов одновременно. На одном из устройств была установлена дополнительная оптика для крупного кадра, что позволило ускорить процесс. Отдельным преимуществом для съемочной группы стала возможность сразу просматривать отснятый материал на больших и ярких экранах смартфонов. По словам режиссера, его особенно удивил и впечатлил обширный набор функций камеры Galaxy Note20, который позволил без дополнительных усилий реализовать сложную съемку, включая сложные кадры с перефокусировкой, таймлапсы. Прекрасно себя проявила функция стабилизации при использовании как в руках, так и на квадракоптере.

Мобильные технологии в последнее время получают все более широкое применение, иногда полностью заменяя собой профессиональную технику. На смартфоны Samsung Galaxy уже был снят сериал «Взаперти», а новый выпуск одного из самых популярных телешоу о путешествиях еще раз демонстрирует, что устройства Galaxy с блеском справляются даже с самыми сложными задачами, позволяя сэкономить время и бюджет без ущерба для яркости и четкости картинки. В новом выпуске «Орла и решки» зрители увидят впечатляющие кадры удивительной африканской природы и достопримечательностей, созданные с помощью смартфонов. Еще несколько лет назад это казалось фантастикой, но сегодня профессиональное оборудование для фото и видео есть в кармане даже у простых пользователей.

«Создание уникального контента – один из самых мощных и масштабных инструментов для работы с аудиторией. Это отличное «топливо» для дальнейшей активности бренда на всех площадках: ТВ, digital и соц. сети, точки продаж. Настоящий вызов для нашей команды, яркий невероятный кейс, сенсация – всё это съемка полного выпуска самого популярного телевизионного тревел-шоу «Орел&Решка» исключительно на смартфон Samsung! Будущее наступило, границ не существует» – комментирует Светлана Дорогонова, руководитель отдела продаж ГПМ РТВ

Серия смартфонов Samsung Galaxy Note20 – это универсальные гаджеты для работы и развлечений: устройства позволяют повысить свою продуктивность, создавать фото и видео профессионального качества при любых условиях освещения, а также отлично подходят для мобильного гейминга и просмотра контента на большом безрамочном экране. Одна из главных «фишек» Note –  универсальное электронное перо S Pen, которое подходит для самого широкого круга задач: от записи рукописных заметок до дистанционного управления камерой и проведения презентаций.  Съемка в профессиональном режиме Pro Video с высоким разрешением при частоте 24 кадра в секунду позволяет почувствовать себя настоящим режиссером и реализовать все свои креативные задумки благодаря возможности настроить каждый параметр съемки от ISO до скорости зума.

Телешоу «Орел и решка. Чудеса света» посвящено путешествию ведущих Антона Зайцева и Василисы Хвостовой по самым удивительным местам планеты. По правилам программы один из них должен провести выходные в новом городе, потратив всего 100 долларов, а другой может воспользоваться неограниченной суммой, хранящейся на «золотой» банковской карте. Шоу выходит в эфир с 2011 года и три раза становилось лауреатом национальной телевизионной премии ТЭФИ.

Выпуск «Водопад Виктория (Замбия)» выйдет на телеканале «Пятница» и на официальном канале «Орла и решки» на YouTube 28 декабря в 22:00 по московскому времени.

Yaplakal — Сколько зарабатывают ведущие 1 канала Дмитрий..

.

ничего не понял. но понял что ему помогала команда криптовалютчиков включая папу. а кто-то купил у него кита… короче. обналичка или прачечная для незаконно добытых денег через криптотранзакции типа покупки неких китов мальчика. И не придерёшься. Откуда деньги ? Кита продал. За Этерниум. Кому продал ? А вон ему. Ты кита купил ? Да, я кита купил. Чем докажешь ? А вот сертификат подлинности у меня.
??????/////
………. Alex Musk

24 Jul 2021
5.5k
12-летний мальчик заработал больше $160 000 в Ethereum на продаже коллекции NFT
Подросток создал собственную коллекцию NFT Weird Whales с пиксельными изображениями китов и заработал на их продаже более 166 000 долларов в эквиваленте Ethereum всего за 24 часа.
12-летний Беньямин Ахмед с детства был вовлечен в IT-индустрию и инновационные цифровые продукты, такие как криптовалюты, благодаря своему отцу Имрану разработчику в финансовой организации. Он рассказал Беньямину и его брату что такое HTML и CSS, когда тем было лишь 5 лет. С тех пор он оттачивал навыки при помощи известного среди программистов ресурса Codewars.

После того, как Беньямин увидел творчество CryptoPunks и Bored Ape Yacht Club, он загорелся идеей создания собственной коллекции NFT, сравнив это с “онлайн-достижением”, подобно тем, что можно получить в видеоиграх. Разработчик Boring Bananas проекта, связанного с невзаимозаменяемыми токенами, помог мальчику с его Weird Whales. Именно он переслал юному энтузиасту скрипт, написанный на Python, для создания личной серии изображений.

Отец Беньямина подсказал как настроить создание своих пиксельных картинок с забавными китами, после чего и начал кипеть креативный процесс. Его результатом стали 3350 уникальных NFT, которые принесли начинающему бизнесмену 80 ETH менее, чем за 9 часов. С продвижением работ Беньямина в сети помогла команда Boring Bananas.

Некоторые 8-битные изображения китов сочли особенно ценными. Так, например, 1205-го кита RaritySniper назвал “восьмым по редкости” в коллекции. Скорее всего это и стало причиной его приобретения одним из участников аукциона за 6000 долларов в Ethereum-эквиваленте.

По словам самого Беньямина, он получает 2,5% с каждой продажи NFT через OpenSea. Заработанные токены мальчик решил не обменивать, а холдить в надежде, что они станут хорошей инвестицией в будущее.

Трудно представить реакцию приверженцев традиционных валют, которые вряд ли смогут уложить в голове мысль, что подросток получил больше 166 000 долларов без специального разрешения родителей, либо опекунов. https://thecoinshark.net/ru/NFT-non-fungible-token/12-year-old-boy-earned-more-than-160-000-in-ethereum-from-the-sale-of-the-nft-collection

9 секретов «Орла и решки», которые скрываются за красивой картинкой

Для многих быть ведущим «Орла и решки» — это мечта: новые страны, знакомства, экзотическая еда и другие плюсы постоянных путешествий. Однако изнанка шоу не всегда соответствует экранной картинке и бывает не такой приятной. Так, в одном из интервью ведущая Регина Тодоренко проговорилась, что «золотой карты» на самом деле нет, а все время, проведенное в элитных отелях, уходит на съемки.

Мы в AdMe.ru давно смотрим программу «Орел и решка» и, конечно же, заинтересовались тем, что происходит за кадром этого популярного шоу и как сильно оно отличается от реального путешествия.

1. Шоу о развлечениях, а не о настоящем путешествии

С тем, что показывают в передаче, за границу не поедешь. Программа делается с упором на шоу, практически исключая познавательную часть, разъяснения особенностей страны пребывания и прочее. Так, в по-европейски размеренной Вене ведущие провели экстрим-тур, включающий прыжки с тарзанкой, рафтинг и посещение парка аттракционов.

Получается, что продюсеры шоу в погоне за контентом упускают из виду многие плюсы реального путешествия, занимаясь одними и теми же вещами и в Австрии, и в Зимбабве, и в Китае.

2. Все построено по четко прописанному сценарию

В программе нет места спонтанности: все построено по четкому сценарию, которого необходимо придерживаться. Места проживания, маршруты передвижения, диалоги с местными жителями распланированы и заказаны заранее. Стоит только обратить внимание на то, что закадровый голос преобладает над диалогами с местными.

К тому же съемки продолжаются при любых обстоятельствах: при температуре, отравлении, аллергии. Впрочем, не всегда это так работает: во время съемок на Кубе ведущая Настя Ивлеева выпила местный коктейль в баре, после чего слегла с отравлением, и съемочный процесс в этот день пришлось свернуть.

А так выглядят съемки тех самых вступительных роликов. Съемочная команда состоит из 7–8 человек, которые также определяют между собой, какого же туриста сопровождать: «бедного» или «богатого».

3. Реклама — одна из составляющих частей передачи

Обилие рекламы влияет на содержательность передачи: за 40-минутный эпизод появляется примерно 3–4 интегрированных рекламных ролика. Раскрутка спонсорских товаров не всегда к месту, а часто даже выбивается из концепции шоу.

С другой стороны, без рекламы программа не существовала бы в том виде, в котором мы ее смотрим. И несмотря на то, что ведущие отвлекаются на съемки рекламных дублей, мы получаем довольно много развлекательного контента.

4. Некоторые факты умалчиваются или привираются ради лучшей картинки

Путешественники Лена Гитт и Павел Котиков заметили целый ряд ляпов, допущенных ведущими в выпуске «Кругосветка. Джакарта».

• Высокие преграды на тротуарах на самом деле существуют, но в шоу показали лишь самую высокую и неудобную для пешеходов. На самом деле они гораздо ниже или вовсе имеют проход.
• Ведущая Регина, стоя возле касс, с удивлением рассказывает о том, что из аэропорта в центр никак не добраться на автобусе. Путешественники же с легкостью купили билет в город в той же кассе.
• Непривлекательный моллюск, которого ела ведущая, — это на самом деле не самое распространенное блюдо в Индонезии: местные жители в основном питаются рисом с мясом.

• Вид со смотровой площадки зачем-то показали не с лучшего ракурса, сняв бедные районы, покрытые смогом. С того же места, повернув камеру, можно сделать фото красивой части города.
• В погоне за кадром Леся Никитюк в элитном транспорте едет по большой пробке, хотя в Джакарте есть свободные платные дороги.
• А перейти дорогу гораздо легче, чем показали ведущие, рассказывая, что «водителям плевать на пешеходов». На самом деле в городе развита культура вождения: достаточно поднять вверх руку — и все автомобили остановятся, чтобы пропустить вас.

5. Страны для поездок выбираются по рейтингам

В передаче крайне редко попадаются сюжеты об африканских странах. Все потому, что телеканалы не хотят снимать в Африке из-за низкого спроса на это направление у зрителей. Людям больше нравятся спокойные и приятные места, куда они могут или хотели бы поехать самостоятельно.

К тому же выпуски в Африке обходятся дороже по причине перелетов и местных особенностей. Со слов Евгения Синельникова, приходится регулярно за все платить: доходит до того, что требуют деньги за каждого человека, попавшего в кадр. Стоит учесть и опасность различных заболеваний, лихорадок, а также сложную ситуацию во многих странах.

6. «Золотая карта» имеет лимит

Одна из ведущих программы, Регина Тодоренко, рассказала, что безлимитность «золотой карты» — это миф. На ней действительно много средств, но траты четко регламентируются. К тому же некоторые шикарные заведения арендуются лишь на несколько часов, а ночуют ведущие в более скромных номерах.

Автор и продюсер «Орла и решки» Елена Синельникова отчасти подтвердила слова ведущей. В эфире, посвященном 8-летию шоу, она рассказала, что есть страны, которые «могут либо делать скидки, либо предоставлять что-то бесплатно, чтобы их разрекламировали».

7. В рюкзак можно положить личные вещи

Ведущий, которому выпадает ходить со $ 100 в кармане, может взять с собой любые личные вещи, кроме еды. Обычно в рюкзаке лежат сменная одежда, обувь, бутылка воды и плед. Однажды ведущая Регина Тодоренко даже показала содержимое своей сумки: внутри лежали салфетки, мандарин, вода, маска для сна и массажер для лица.

Но есть и обязательные вещи: аптечка, маска с трубкой для морских шоу, спальный мешок или палатка, если в стране пребывания разрешен кемпинг.

8. У создателей шоу есть любимые места для съемок

Так, многие крупные города посещались 3 раза: Берлин, Париж, Лондон, Амстердам, Будапешт и другие. А самым любимым местом оказались Мальдивы, которым посвящено целых 4 эпизода.

Статистика трат на съемки, перелеты, визы и проживание съемочной команды не разглашается, но считается, что самым дорогим вышел выпуск с Андреем Бедняковым в Лондоне. Там ведущий потратил более $ 53 тыс., из которых $ 50 тыс. ушли на проживание в элитном отеле. Самым дешевым, с тратами всего в $ 32, оказался Мадагаскар.

9. Некоторые счастливчики действительно находят спрятанные бутылки

В первых выпусках продюсерам нужно было незаметно вставить в передачу рекламу вина. Так и появилась традиция прятать бутылку с купюрой достоинством в $ 100. С тех пор спонсор ушел, а обычай остался, и он нравится зрителям.

В бутылке, помимо денег, лежит записка с просьбой сделать фото или записать видео и отправить в редакцию программы «Орел и решка». А инстаграм проекта полнится снимками счастливчиков.

А вы хоть раз пытались найти бутылку с купюрой от «Орла и решки»?

ИВАН УРГАНТ как живет и сколько зарабатывает известный телеведущий ШОК Free (06:12) (8.51 MB)

Вк — vk.com/s_p2017
Данный ролик не преследует цель кого-то оскорбить
Поставь лайк и подпишись на канал!
Тут внизу теги, не читай
иван ургант видео, карты, крапивина ответила киркорову, деньги, два ствола, иван ургант и филипп киркоров, иван ургант о скандале киркорова, філіпп крікоров, нателла крапівіна, егор крид, джейсон стетхэм, нелли уварова, джейсон стэтхем, несчастный случай, кіркоров і крапівіна, филипп киркоров и дава, иван ургант и дава, киркоров и дава, большой куш, iowa, группа фрукты песня интервью гость лера кудрявцева, рената литвинова, владимир познер, лауд feat. thomas mraz, евгений чебатков, владимир кузьмин, глем виш, револьвер, киркоров и крапивина, нателла крапивина, новости шоу бизнеса, glam wish, глем віш, самвел гиновян, давид трезег, джейсон стэйтем, evening urgant, ivan urgant, вера брежнева, jason statham, стэтхэм, джейсон стэтхэм, urgant, best of, funny, comedic, stand-up, tv, the tonight show, камеди, смешные, стэйтем, британский актёр, сергей шнуров, джейсон стэтэм, джейсон майкл стэйтем, maruv, александр ревва, manizha, юлия волкова, зоя, анекдоты, fun, английский актёр, jā-sən stā-thəm, приколы, развлечения, смешно, гости, анастасия ивлеева, дмитрий романов, стендап-комик, сергей пенкин, микс шоу, ургант и дети, иван ургант жена, где живет иван ургант, максим галкин, сергей светлаков, слава мэрлоу, музыкант, саунд-продюсер, трюки, алишер, муся тотибадзе, artemiev, иван ургант дом, сколько зарабатывает ургант, блогер, дарья блохина, альберт ибрагимов, группа фрукты гость rutube дима масленников, сергей жуков, денис мацуев, клава кока, аниса муртаева, карен арутюнов, ургант жена, ургант состояние, ургант автомобиль, ургант дом, где живет ургант, как живет ургант, как живет иван ургант, видеоблогер, владимир машков и, ментал, mental tv, ментал тв, mental, профайлинг, машина времени, imanbek, психологический анализ, иван ургант разбор, ментал тв ургант, психология юмора ивана урганта, анализ ивана урганта, ментал ургант, как иван ургант доминирует, вечерний ургант разбор, как ургант управляет беседой, иван усович, юлия коваль, рустам рептилоид, алексей щербаков, лолита, сергей детков, тамби масаев, l’one, нурлан сабуров, мария аронова, группа фрукты гость rutube нелли уварова, sergei polunin, светлана лобода, елена темникова, валерий меладзе

So it’s quite practical to try, because the current song can be an entertainer when you are happy or sad.

There are many song provider websites available, but I still recommend using the search field from
Playwright Music. because besides being easy, it can help speed up the download process.

Not only can you download songs and videos, Metrolagu is also a site that has a variety of features
various interesting features, namely being able to stream via Metrolagu. Later if you have a lot of quota,
you can directly stream without downloading the song.

This certainly provides benefits for those of you who are lazy to download songs because they may be lazy to increase cellphone memory
you by downloading songs so you can do streaming. If you want to stream songs on your cellphone via
Metrolagu site, how to stream songs using Metrolagu is quite easy.

After you search for the song you want, click the blue button with the logo and the words Play that says Play
located next to the green button with the words download, then play the song immediately.

Not only songs from Indonesian singers or western bands like The Rolling Stones, Sia, Tones and I, Justin
Bieber and Maroon 5 are all you can download. But almost all the world’s artists and singers can be you
find and download the song there.

Собчак и инстамамы: 15 блогеров, которые зарабатывают больше всех в Instagram

В прошлом году Forbes впервые представил рейтинг Instagram-блогеров. В него вошли 15 публичных персон, больше всего заработавших в этой социальной сети. Спустя год в их рядах произошла серьезная ротация — в рейтинге сразу шесть новых лиц, некоторые прошлогодние лидеры уступили позиции. Тем не менее лидером рейтинга вновь стала Ксения Собчак. За прошедший год она второй раз вышла замуж, запустила шоу на «Первом канале» и нарастила аудиторию. Спектр брендов, которые она рекламирует, широк — это и техника Bork, и косметика Mixit, и автомобили Audi — правда, после того, как Собчак пошутила на тему афроамериканских волнений в США на YouTube-шоу Comment Out, а также написала несколько критических реплик по поводу движения Black Lives Matter в своем Instagram, немецкий автоконцерн разорвал с ней контракт.

Второе место в рейтинге заняла певица Полина Гагарина. В аккаунте она делится подробностям своей повседневной жизни, выкладывает фотографии с другими артистами и размещает рекламу. В прошлом году на втором месте была Регина Тодоренко.

Перемены и на третьем месте — Ольгу Бузову сменила блогер Ида Галич. Начав с вайнов в Instagram, в прошлом году она запустила свое шоу для школьников, а в этом стала мамой и ведущей шоу «Такие родители» на «Пятнице!», где со своим мужем делится опытом воспитания ребенка. В рейтинге есть еще два блогера, чей контент во многом посвящен семье и материнству, — это новички Валерия Чекалина и Алина Левда. Кроме них, в рейтинге еще четыре новых имени — Настя Ивлеева, Егор Крид, Рита Дакота и Ксения Бородина.

«Инстамамы изначально были движущей силой Instagram, — рассуждает основатель сервиса WhoIsBlogger Лев Грунин. — Наибольшую аудиторию они набирают в первые годы рождения ребенка, в это же время рекламодатели наиболее активно размещают у них рекламу». Аудитория инстамам — другие молодые мамы, у которых больше времени для выбора товаров онлайн, они чаще совершают покупки, для брендов они в приоритете, добавляет Михаил Карпушин, директор по маркетингу GetBlogger.

В каком бы формате блогеры ни работали, объединяет их одно — «новая искренность». Они стремятся быть ближе к своим подписчикам, демонстрируя не только приятные стороны жизни, публикуя неотфотошопленные фотографии и рассказывая о своей жизни без прикрас. «Instagram перестал быть соцсетью, где пластиковые люди публикуют заумные посты, а стремится к тому, чтобы стать местом, где ты общаешься с популярной персоной как с другом», — резюмирует Карпушин.

Собчак и инстамамы: 15 блогеров, которые зарабатывают больше всех в Instagram

15 фото

Методология 

По просьбе Forbes исследовательская компания WhoIsBlogger, специализирующаяся на интеллектуальном анализе больших объемов данных, проанализировала аккаунты российских Instagram-блогеров с общим числом подписчиков более 2 млн человек. Из них были отобраны 33 блогера с наибольшим количеством рекламных публикаций за год. Далее мы собрали данные о стоимости размещения различных типов публикаций у этих блогеров (с помощью самих блогеров, экспертов и блогерских агентств) и выделили 15 блогеров, заработавших, по этим оценкам, больше всего. Также мы учитывали, что часть постов блогеры размещают по бартеру. Данные проанализированы за период с 1 мая 2019 года по 30 апреля 2020 года. 

Вероятность

— Увеличивают ли 10 орлов подряд вероятность того, что следующий бросок окажется решкой?

они пытаются утверждать, что […] если выпало 10 орлов, то следующая в последовательности, скорее всего, будет хвостом, потому что статистика говорит, что в конце концов он уравновесится.

Есть только «балансировка» в очень частном смысле.

Если это честная монета, то при каждом броске все равно 50-50. Монета не может знать свой прошлый . Он не может знать, что было избыток голов.Он не может компенсировать свое прошлое. Всегда . он просто случайно оказывается орлом или решкой с постоянной вероятностью выпадения решки.

Если $ n_H $ — количество орлов в $ n = n_H + n_T $ бросках ($ n_T $ — количество решек), для честной монеты $ n_H / n_T $ будет стремиться к 1, так как $ n_H + n_T $ уходит в бесконечность . … но $ | n_H-n_T | $ не уходит в 0. Фактически, также уходит в бесконечность !

То есть ничто не делает их более уравновешенными. Счетчики не стремятся к «уравновешиванию».В среднем дисбаланс между количеством орлов и решек на самом деле растет!

Вот результат 100 наборов по 1000 бросков, с серыми линиями, показывающими разницу в количестве голов минус количество решек на каждом шаге.

Серые следы (представляющие $ n_H-n_T $) — это случайное блуждание Бернулли. Если вы представите себе частицу, движущуюся вверх или вниз по оси Y на единичный шаг (случайным образом с равной вероятностью) на каждом временном шаге, то распределение положения частицы со временем будет «размываться» от 0.Он по-прежнему имеет ожидаемое значение 0, но его ожидаемое расстояние от 0 растет как квадратный корень из числа временных шагов. [Примечание для тех, кто думает: «, он говорит об ожидаемой абсолютной разнице или среднеквадратичной разнице » — на самом деле либо: для больших $ n $ первое — $ \ sqrt {2 / \ pi} \ приблизительно $ 80% второго .]

Синяя кривая выше находится в точке $ \ pm \ sqrt {n} $, а зеленая кривая — в точке $ \ pm 2 \ sqrt {n} $. Как видите, типичное расстояние между полными орлами и полными решками растет. Если бы и было что-то, что могло бы «восстановить равенство» — «компенсировать» отклонения от равенства, — они, как правило, не стали бы так далее разрастаться.(Нетрудно показать это алгебраически, но я сомневаюсь, что это убедит вашего друга. Важнейшая часть состоит в том, что дисперсия суммы независимых случайных величин является суммой дисперсий $ <$ см. Конец связанного раздела $> $ — каждый раз, когда вы добавляете еще один подбрасывание монеты, вы добавляете постоянную величину к дисперсии суммы … поэтому дисперсия должна расти пропорционально $ n $. Следовательно, стандартное отклонение увеличивается с $ \ sqrt {n} $. константа, которая добавляется к дисперсии на каждом шаге, в этом случае оказывается равной 1, но это не критично для аргументации.)

Эквивалентно, $ \ frac {| n_H-n_T |} {n_H + n_T} $ действительно переходит в $ 0 $, поскольку общее количество бросков стремится к бесконечности, но только потому, что $ n_H + n_T $ стремится к бесконечности намного быстрее, чем $ | n_H -n_T | $ делает.

Это означает, что если мы разделим совокупный счет на $ n $ на каждом шаге, он будет изгибаться — типичная абсолютная разница в количестве составляет порядка $ \ sqrt {n} $, но типичная абсолютная разница в Тогда пропорция должна быть порядка $ 1 / \ sqrt {n} $.

Вот и все, что происходит.Все более и более крупные * случайные отклонения от равенства — это просто « вымывается из » на , даже больший знаменатель .

* увеличение типичного абсолютного размера

Смотрите небольшую анимацию на полях, здесь

Если ваш друг не убежден, подбросьте несколько монет. Каждый раз, когда вам выпадает три орла подряд, попросите его или ее определить вероятность выпадения решки при следующем броске (это менее 50%), которая, по его мнению, должна быть справедливой, исходя из его рассуждений. Попросите их дать вам соответствующие шансы (то есть он или она должны быть готовы заплатить немного больше, чем 1: 1, если вы делаете ставку орлом, поскольку они настаивают, что решка более вероятна).Лучше всего, если он будет настроен как много ставок каждая на небольшую сумму денег. (Не удивляйтесь, если есть какое-то оправдание тому, почему они не могут принять свою половину ставки — но это, по крайней мере, кажется, резко снижает пыл, с которым удерживается позиция.)

[Однако все эти обсуждения основаны на честности монеты. Если бы монета была нечестной (50-50), тогда потребовалась бы другая версия обсуждения — основанная на отклонениях от ожидаемой разницы в пропорциях.Если вы выпадете 10 голов за 10 бросков, это может вызвать у вас подозрение в предположении, что p = 0,5. Хорошо брошенная монета должна быть близка к справедливой — взвешенной или нет — но на самом деле все же демонстрировать небольшую, но пригодную для использования предвзятость, особенно если человек, эксплуатирующий ее, — это кто-то вроде Перси Диакониса. Крученые монеты , с другой стороны, могут быть весьма восприимчивы к смещению из-за большего веса на одной стороне.]

Древовидные методы 5D

Древовидные методы 5D

Методы 5D-дерева

Мы рассмотрим несколько примеров, в которых формула условной вероятности может быть объединена с элементарными правилами вероятности, чтобы прийти к решению.

пример 1

Вернемся к подбрасыванию монеты. Сначала мы подбросим две монеты. Какова вероятность получить (а) две решки, (б) два решки, (в) одну голову и одну решку? Чтобы быть конкретным, мы называем монеты «первая монета» и «вторая монета», а события маркируем.

Используя общую формулу условной вероятности,

P (E Ù F) = P (E) · P (F | E),

выводим, что вероятность выпадения двух орлов равна

P (2 головки) = P (1H Ù 2H) = P (1H) и средняя точка P (2H | 1H).

Теперь вероятность того, что первая монета окажется орлом, равна

.

P (1H) = 1/2.

Аналогично, вероятность того, что вторая монета — голова, при условии, что первая монета — голова, равна

.

P (2H | 1H) = 1/2.

На самом деле то, что происходит с первой монетой, не имеет ничего общего со второй монетой, и наоборот — мы говорим, что две монеты «независимы» друг от друга. Независимо от того, что происходит с первой монетой, вероятность того, что вторая монета окажется орлом, остается равной 1/2; таким образом, наша формула дает

П (2 головки) = 1/2 · 1/2 = 1/4.

С помощью того же аргумента получаем, что

P (2 хвоста) = P (1T Ù 2T) = P (1T) · P (2T | 1T) = 1/2 и середина 1/2 = 1/4.

Вопрос об одной голове и одном хвосте немного сложнее, потому что есть два пути, по которым это событие может произойти: мы можем получить голову на первой монете и хвост на второй, или хвост на первой монете и голова на втором.Мы объединяем формулу условной вероятности с нашим Правилом вероятности 5 и вычисляем, что

(Поскольку события (1H Ù 2T) и (1T Ù 2H) являются взаимоисключающими, нам не нужно выполнять вычитание для двойного счета.)

Вышеупомянутый метод может быть проиллюстрирован древовидной диаграммой внизу слева. У дерева 4 листа — верхний лист соответствует 2 головам, нижний лист — двум хвостам, а каждый из двух других листьев — одной голове и одному хвосту. Чтобы вычислить вероятность листка, мы умножаем вероятности, указанные на ветвях, ведущих к листу из «Начать». Например, вероятность выпадения двух решек равна 1/2 · 1/2 = 1/4, а вероятность выпадения двух решек такая же. Поскольку есть два листа, соответствующие одной голове и одному хвосту, каждый с вероятностью 1/4, вероятность этого события составляет 1/4 + 1/4 = 1/2.

Для 3 монет работает аналогичный метод, как показано на древовидной диаграмме справа. Например, чтобы найти вероятность выпадения всех орлов при подбрасывании 3 монет, соответствующих верхнему листу в дереве, мы выполняем расчет

P (3 головки) = P (1H Ù 2H Ù 3H) = P (1H) · P (2H) · P (3H) = 1/2 · 1/2 · 1/2 = 1/8.

Сложнее обстоит дело с двумя головами и одним хвостом. Дерево показывает, что есть три последовательности, дающие две головы и один хвост, а именно

.

1) голова, голова, хвост, 2) голова, хвост, голова, 3) хвост, голова, голова.

Первый из них имеет вероятность

P (1H Ù 2H Ù 3T) = P (1H) · P (2H) · P (3T) = 1/2 · 1/2 · 1/2 = 1/8.

Подобные вычисления показывают, что два других способа выпадения двух орлов и хвоста имеют одинаковую вероятность 1/8; затем складывая эти три вероятности, получаем, что

П (2 головы и 1 хвост) = 1/8 + 1/8 + 1/8 = 3/8.

Древовидный метод работает более чем с тремя монетами, хотя возможностей может быть много, а древовидные диаграммы ужасны. При подбрасывании четырех монет есть только один способ получить все решки, поэтому вероятность этого события составляет

.

Однако, если мы хотим знать, например, вероятность
Получив две решки и две решки, расчеты усложняются, потому что
есть несколько возможных последовательностей.(Вы можете их все перечислить?) По проблемам
с участием многих монет используются методы подсчета.

пример 2

Когда Грейс выполняет штрафной бросок, вероятность ее попадания составляет 3/4. Если на Грейс нарушили правила и она выполнит два штрафных броска, какова вероятность, что она (а) выполнит оба броска, (б) промахнется по обоим выстрелам, (в) нанесет один удар и пропустит один бросок?

Мы будем предполагать, что то, что делает Грейс во время второго броска, не зависит от того, что она делает во время первого броска, хотя в реальной баскетбольной игре это предположение может быть не совсем верным.Например, если она пропустит первый выстрел, она может больше сосредоточиться на втором и увеличить вероятность попадания. С другой стороны, пропуск первого выстрела может заставить ее нервничать и упустить второй выстрел. Но для простоты мы проигнорируем эти соображения и предположим, что ее шансы выполнить любой бросок всегда равны 3/4.

Проблема очень похожа на подбрасывание двух монет, за исключением того, что вероятности разные.Древовидная диаграмма отображается справа. Вероятность того, что Грейс попадет в оба выстрела, равна

.

P (удар Ù удар) = P (удар) · P (удар) = 3/4 · 3/4 = 9/16,

и вероятность того, что она промахнется, равна

.

P (промах Ù промах) = P (промах) · P (промах) = 1/4 · 1/4 = 1/16.

Древовидная диаграмма показывает, что есть два способа, которыми Грейс может выстрелить одним выстрелом и промахнуться другим — она ​​может сделать первый выстрел и промахнуться вторым или наоборот. Вероятность этого события

.

Теперь предположим, что на Грейс фол во время трехочкового броска, и она выполнит три штрафных броска. Вероятность попадания во все три —

.

P (удар Ù удар Ù удар) = P (удар) · P (удар) · P (удар) = 3/4 · 3/4 · 3/4 = 27/64,

, в то время как вероятность того, что она пропустит все три, равна

.

P (промах Ù промах Ù промах) = P (промах) · P (промах) · P (промах) = 1/4 · 1/4 · 1/4 = 1/64.

Есть три способа, которыми Грейс может выполнить два штрафных броска и пропустить один, и вероятность этого события равна

.

С помощью аналогичных вычислений вы можете проверить, что вероятность одного попадания и двух промахов равна 9/64.

пример 3

Из колоды карт будут последовательно вытянуты две карты. Какова вероятность получить двух королей, если

(a) первая карта заменена на и карты перетасованы перед вторым розыгрышем?

(b) первая карта не заменена перед вторым розыгрышем?

Для обеих частей (a) и (b) мы используем формулу условной вероятности

В каждом случае вероятность того, что первая карта — король, равна 4/52. В (а), когда первая карта заменяется, вероятность того, что вторая карта является королем, остается прежней, 4/52. Но в (b) после того, как первый король вытащен, остается только 51 карта и 3 короля, поэтому вероятность того, что вторая карта — король, учитывая, что первая — король, составляет 3/51. Таким образом, в двух случаях вероятность получить двух королей составляет

.

Теперь давайте рассмотрим вероятность получения короля и «не короля» в двух дро. Мы используем «K» для обозначения «короля» и «N» для обозначения «некороля», и в обоих (a) и (b) мы используем формулу

В случае (a), при замене, вычисления продолжаются как

, тогда как в случае (b), когда первая карта не заменяется, вычисления меняются на

Таким образом, вероятность король и не король — это 24/169 ≈.142, когда первая карта заменяется перед вторым розыгрышем, и 32/221 ≈ 0,145, когда первая карта не заменяется перед вторым розыгрышем.

Предыдущий пример карты является простой иллюстрацией статистических концепций выборки с заменой и выборки без замены . В первом случае то, что происходит во втором испытании, не зависит от результатов первого испытания, но во втором случае результаты первого испытания действительно влияют на второе испытание.

пример 4

В сумке 6 красных шариков, 4 синих шарика и 2 зеленых шарика. Три шарика будут извлечены из мешка наугад, по одному шарику за раз и без замены . Вычисляем вероятность получения

Всего в сумке 6 + 4 + 2 = 12 шариков. Поскольку мы делаем выборку без замены, после каждого розыгрыша это число уменьшается на единицу.

(a) Единственный способ получить 3 красных шарика — это последовательность красный, красный и красный. Вероятность того, что первый шарик станет красным — 6/12. После того, как первый шарик станет красным, останется 11 шариков и 5 красных; тогда вероятность того, что второй будет красным, равна 5/11.Наконец, после того, как первые два станут красными, в сумке останется 4 красных шарика из 10, и вероятность того, что третий будет красным, равна 4/10. Вероятность получения трех красных шариков равна произведению

.

P (RRR) = 6/12 · 5/11 · 4/10 = 1/11.

(б) Вероятность последовательности красный, синий, зеленый равна

.

P (RBG) = 6/12 · 4/11 · 2/10 = 2/55.

(c) Три последовательности, дающие 2 красных шарика и 1 зеленый шарик: RRG, RGR, GRR. Таким образом, вероятность выпадения 2 красных шариков и 1 зеленого равна

.

(d) Есть шесть последовательностей, дающих по одному шарику каждого цвета; их

RBG, RGB, BRG, BGR, GRB, GBR.

Вероятность первой последовательности, RBG, была рассчитана в части (b) как 2/55. Вы обнаружите, что вероятность каждой из остальных 5 последовательностей одинакова, поскольку в каждом случае три фактора в числителе — 6, 4 и 2, а три фактора в знаменателе — 12, 11 и 10. Таким образом, вероятность выпадения одного шарика каждого цвета равна сумме

.

(e) Последовательности, дающие три шарика одного цвета: RRR и BBB. (Последовательность GGG невозможна, так как есть только 2 зеленых шарика.) Таким образом, вероятность этого события составляет

Обратите внимание, что если бы мы производили выборку с заменой, то есть если бы мы заменяли шарик после каждого розыгрыша, то арифметика отличается, потому что вероятность для любого данного цвета остается неизменной от розыгрыша к розыгрышу.Например, ответ на часть (а) изменится на

.

P (RRR) = 6/12 · 6/12 · 6/12 = 1/2 · 1/2 · 1/2 = 1/8.

пример 5

Предположим, что в городе Гонолулу 1/2 всех избирателей — демократы, 1/3 всех избирателей — республиканцы, а 1/6 — независимые. Специалист по опросу общественного мнения позвонит двум избирателям наугад. Рассчитываем вероятность, что она позвонит по номеру

.

(а) 2 республиканца,

(б) нет республиканцев,

(c) Демократ и независимый,

(d) два избирателя одного типа.

Вероятности для каждого звонка —

P (D) = 1/2,
P (R) = 1/3,
P (I) = 1/6.

(Поскольку в Гонолулу так много избирателей, вероятность существенно не изменится, если опросчик от звонка к звонку дисквалифицирует людей, которым он уже звонил.)

(a) Вероятность появления двух республиканцев —

.

P (RR) = 1/3 · 1/3 = 1/9.

(b) Вероятность того, что ни при каком призыве не окажется республиканец, равна

.

P (~ R) = 1 — P (R) = 1 — 1/3 = 2/3,

и вероятность того, что не будет республиканца в двух последовательных призывах, равна

.

P (~ R & ~ R) = P (~ R) · P (~ R) = 2/3 · 2/3 = 4/9.

(c) Есть два способа, которыми опрашивающий может позвонить демократу и независимому — сначала он может позвонить демократу, а вторым — независимому, или наоборот. Вероятность

(d) Три последовательности, дающие двух голосующих одного типа: DD, RR, II, а вероятность этого события равна сумме

.

пример 6

Вероятность того, что Альберт выберет коричневый мешок, равна 1/2, как и синий мешок.

(a) Чтобы получить сэндвич с курицей, Альберт должен выбрать коричневый мешок, а затем сэндвич с курицей из этого мешка.Мы используем формулу условной вероятности, чтобы вывести, что

(b) Чтобы получить бутерброд с ветчиной, Альберт может выбрать либо мешок, либо бутерброд с ветчиной; вероятность

пример 7

Бейсбольная команда Гавайского университета сыграет три серии игр со Стэнфордским университетом. Предположим, вероятность того, что Гавайи выиграют любую игру со Стэнфордом, равна 2/3. Какова вероятность, что на Гавайях будет больше игр, чем в Стэнфорде в этой серии?

Пусть H обозначает победу Гавайев, а S — победу Стэнфорда; тогда мы можем записать четыре последовательности, в результате которых Гавайи выиграют больше игр, чем Стэнфорд, как

HHH, HHS, HSH, SHH.

Вероятность того, что Стэнфорд выиграет любую игру, равна 1–2/3 = 1/3. Вероятность того, что Гавайи выиграют больше игр в этой серии, равна

.

УПРАЖНЕНИЯ 5D

1. Один кубик будет брошен дважды.Используйте древовидный метод , чтобы определить вероятность получения
   

   шесть на каждый бросок, шестерка при первом броске и пятерка при втором, сумма одиннадцати на двух подбрасываниях, шестерка при первом броске и нечетное число при втором, сумма четырех на двух бросках, тот же номер на двух подбрасываниях.

2. Красный кубик, синий кубик и желтый кубик будут брошены.Рассчитайте вероятность получения
   

   по пять на каждой матрице, нечетное число на каждом кубике, одно нечетное число и два четных числа, два на красном кубике, три на синем и четыре на желтом, три числа, все делимые на три, сумма четырех на кубике трех, сумма пяти на кубике трех, одинаковый номер на всех трех кристаллах.

3. Если вы подбросите монету шесть раз, какова вероятность, что вы получите
   1. все головы?
   2. хоть один хвостик?

4. Если вы берете последовательно две карты из хорошо перемешанной колоды игральных карт, без замены , какова вероятность того, что

   1. обе карточки красные?
   2. первая карта черная, а вторая красная?
   3. одна карта черная, а одна красная?
   4. обе карты червы?
   5. одна карта сердце, а другая лопата?

5. Повторите задачу 4, но на этот раз предположите, что после первого розыгрыша карта возвращается и колода перетасовывается.

7. Когда квотербек Джо делает футбольный пас, вероятность полного паса равна 1/2, вероятность неполного паса — 2/5, а вероятность перехвата — 1/10. .Какова вероятность того, что при следующих двух проходах Джо бросит
   

   два заканчивания, полный проход, за которым следует неполный проход, полный проход и неполный проход, один перехват и полный или неполный проход?

8. Каждый раз, когда Джойс играет с Кевином в пинг-понг, она выигрывает в 3/5 случаев.Двое сыграют по три игры. Рассчитайте вероятность победы Джойса
   

   все три игры, первые две игры, а третью проиграть, две игры, одна из игр, ни одна из игр, На игр больше, чем у Кевина.

10. В ящике есть 5 черных носков, 3 белых носка и 2 серых носка. Уилбур подойдет ночью и выберет наугад два носка. Какова вероятность, что он получит

    1. два черных носка,
    2. носок белый и носок серый,
    3. два носка одного цвета?

Кто-нибудь когда-нибудь переворачивал голову 76 раз подряд?

Абсурдистская пьеса Тома Стоппарда Розенкранц и Гильденстерн мертвы начинается с того, что один из них, Гильденстерн (или Розенкранц?), Подбрасывает монеты. «Головы», — говорит Розенкранц и берет монету. Гильденстерн снова переворачивается.«Головы», — говорит Розенкранц и берет монету. Еще один бросок. «Головы». И снова «Головы». Вскоре мы узнаем, что Гильденстерн подбросил 76 монет, и все они выпали орлом. «Более слабый человек, — отмечает он, — может быть побужден пересмотреть свою веру, хотя бы в чем-либо другом, по крайней мере, в законе вероятности».

Я подбрасывал монеты миллиарды и миллиарды лет, чтобы получить эту картину. Изображение: Эвелин Лэмб.

По мере того, как они продолжают подбрасывать монеты, а кошелек Розенкранца продолжает расти, Гильденстерн приходит к выводу, что есть несколько возможных объяснений крайне маловероятной серии орлов:

«Первое: я готов.Внутри, где ничего не видно, я сущность человека, который прядет двуглавые монеты и ставит сам против себя в частном искуплении за забытое прошлое…

«Два: время остановилось, и единственный опыт вращения одной монеты один раз было повторено девяносто раз…

«Три: божественное вмешательство, то есть добрый поворот свыше в отношении него, ср. сыны Израилевы, или возмездие свыше за меня, ср. Жена Лота…

«Четверка: впечатляющее подтверждение принципа, согласно которому каждая отдельная монета, раскрученная индивидуально, с такой же вероятностью выпадет орлом, как и решка, и поэтому не должна вызывать удивления каждый раз в отдельности.«

Когда я смотрел эту сцену (во время отличной постановки пьесы в моем университете), я задавался вопросом, каковы были шансы. Вероятно ли, что кто-нибудь в мире бросил орел 76 раз подряд на честную монету? Я у меня нет очень хорошей интуиции в отношении больших чисел, поэтому я действительно не знал, в каком направлении это должно происходить. С одной стороны, крайне маловероятно, что любой отдельный запуск из 76 монет является орлом. С другой стороны, 7 миллиардов Это много людей. Все они подбрасывают монеты? Наверное, нет, но некоторые из них.Если я подброшу монету 76 раз, я смогу получить в общей сложности 2 ⁷⁶ различных цепочек орлов и решек, и только одна из них будет орлом. Вольфрам Альфа сообщает мне, что 2 ⁷⁶ составляет примерно 7,5 × 10 ²² , поэтому шансы получить 76 орлов подряд составляют примерно 1,3 × 10 ^-23 , что намного ближе к 0, чем к 1 дюйму. 7 миллиардов. Даже если все в мире подбрасывали монеты по крайней мере 76 раз, почти нет шансов, что все последние 76 подбрасываний кого-либо были орлом.

Итак, какой является самой длинной цепочкой орлов, которую, вероятно, видел кто-либо в мире, если предположить, что они подбрасывают справедливые монеты, которые имеют 50/50 шансов выпасть орлом при любом отдельном подбрасывании? На это нет однозначного ответа. Мы должны сделать некоторые предположения о флипперах для монет и сделать выбор в отношении того, как сформулировать вопрос.

Мы могли бы спросить, какое наибольшее число n , чтобы кто-то, вероятно, перевернул n орлов в своих последних n подбрасываний монеты.Другими словами, какова самая длинная текущая цепочка голов? Эта проблема довольно проста: есть 1 шанс из 2 ⁿ получить n последовательных орлов за n флипов. Нам действительно нужно решить, сколько людей в мире подбрасывают монеты на регулярной основе. Я мало что знаю о подбрасывании монет в других культурах, но предполагаю, что существует не более миллиарда обычных подбрасываний монет. Миллиард, вероятно, завышенная оценка, но это хорошее круглое число, так что я соглашусь с ним.Мы хотим выяснить, что n делает 2 ⁿ примерно равным 1 миллиарду, и оказывается, что 30 чертовски близко. Если есть миллиард людей, которые подбрасывали монеты по крайней мере 30 раз, то неудивительно, если один из них перевернул 30 орлов за последние 30 подбрасываний.

С другой стороны, возможно, мы хотим спросить, какая самая длинная цепочка голов, которую когда-либо видели. Поэтому вместо того, чтобы спрашивать, были ли последние 30 подбрасываний орлом, мы спрашиваем, видел ли кто-нибудь, кто подбрасывал монету, скажем, 100 раз, цепочку из 30 орлов.Это намного более вероятно: вероятность выпадения последовательности из 30 решек подряд где-то из ваших 100 флипов составляет примерно 1 из 30 миллионов. Если в мире насчитывается не менее 30 миллионов человек, которые подбрасывали монету 100 раз, неудивительно, если один из них в какой-то момент подбросил 30 орлов подряд. Если мы предположим, что есть миллиард людей, которые подбрасывали монеты по крайней мере 100 раз, мы увидим, что для одного из них было бы не слишком удивительно, если бы где-то там была цепочка из 35 голов подряд.76 голов подряд (или 90, возможная попытка Розенкранца) гораздо менее вероятны. Если вы подбросите монету 500 раз, есть только 1 шанс из 3,5 × 10 ²⁰ , чтобы получить цепочку из 76 голов. Это в тысячу раз более вероятно, чем если бы последних 76 флипов были орлом, но это все еще невероятно маловероятно.

Связанный с этим вопрос заключается в том, сколько раз Розенкранцу и Гильденстерну пришлось бы подбрасывать монеты до , ожидая, что в какой-то момент своих подбрасываний наберет 90 орлов. Длина самой длинной ожидаемой цепочки (pdf) растет довольно медленно по сравнению с общим количеством подбрасываний монеты.В случае 100 подбрасываний монет приблизительная ожидаемая длина самой длинной серии орлов составляет 6. Для 1000 подбрасываний ожидаемая длина самой длинной серии увеличивается только до 9. Я немного поигрался с числами и обнаружил, что если вы подбросил монету 2 000 000 000 000 000 000 000 000 000, или 2 × 10 ²⁷ , раз, вы должны ожидать, что ваша самая длинная серия орлов будет около 90. Возможно, Розенкранц и Гильденстерн мертвы монета в секунду в миллиарды раз больше, чем существует Вселенная.

После обработки чисел я убедился, что никто в мире никогда не бросал орла 76 или 90 раз подряд на честной монете, как это сделали Розенкранц и Гильденстерн в пьесе. Но, полагаю, в этом волшебство театра. Конечно, Стоппард никогда не объясняет нам невероятного успеха Розенкранца. Однако он и Гильденстерн используют свою противоречащую логике удачу, чтобы выиграть несколько ставок с «игроком», лидером бродячей труппы актеров. После того, как игрок уходит прочь, Розенкранц смотрит на последнюю подброшенную монету и говорит: «Я говорю — это было удачей…это решка ».

Если вы хотите узнать больше о подбрасывании монет и вероятности, ознакомьтесь с моим сообщением по этой теме в блоге математических блогов.

Видео: анализ головы и хвоста в ИИ. на простом языке

Head and Tail Analysis исправляет отправленные пользователями поисковые запросы, которые не возвращают никаких результатов из-за неправильного написания, странного порядка слов или по другим причинам. Lucid Thinks объясняет анализ головы и хвоста, запросы головы, запросы торса и хвосты, а также то, как ИИ может исправить поиск, чтобы найти то, что вам нужно.

Прямо сейчас вы можете смотреть как первый, так и второй сезон.

Подпишитесь на канал Lucid Thinkts и обязательно оставляйте свои вопросы и комментарии к каждому видео.

Выписка:

Вы когда-нибудь пытались найти что-то и получить результаты, даже не близкие к тому, что вы хотели или даже имели в виду? Есть способ, которым ИИ может в этом помочь. Фехтование? Ты меня разыгрываешь.

Иногда наши поисковые запросы или запросы имеют двойное значение и могут привести к сбивающим с толку и нерелевантным результатам.В мире технологий существует три типа поиска. Головы, хвосты и туловища. Заголовок — это запрос, который люди много ищут, и эти слова часто встречаются в нашем наборе данных. По крайней мере, для большинства кликов и успешных результатов, таких как взаимодействие, просмотры или покупки. Запрос туловища встречается реже и обычно приводит к меньшему количеству кликов. Некоторые люди получают то, что ищут, другие — нет. Хвостовой запрос — это далеко не конец. Это случается не часто, и результаты не очень точные.Да и кликов не так уж и много. Часто это просто порядок слов или орфографическая ошибка.

Давайте вернемся к мисс Харрис, помните нашу воспитательницу детского сада? В нашем классе сезон рисования пальцами. И эти красочные маленькие ручки находят свой путь по всему ее новому iPad. Она ищет и не возвращает результатов, потому что слово «iPad» написано с ошибкой. Это делает этот запрос хвостом.

Затем мисс Харрис набирает… И БАМ! Она получает именно то, что ищет. Это довольно специфично, не то, что ищут большинство людей.Таким образом, это запрос на торс. Мисс Харрис знала, что нужно сузить область поиска, чтобы получить то, что она хотела. Но не все будут так поступать. Вот почему так важны хвостовые поиски. Они упускают возможности.

Итак, как мы можем превратить отсутствие кликов в успешные?

Глядя на сигналы. Помните те?

Для работы анализа головы и хвоста вам понадобится множество сигналов. Эти сигналы позволяют компьютеру выявлять закономерности и определять намерения. Или что пользователь, вероятно, имел в виду под этим поиском.

AI можно использовать для превращения хвостовых запросов в головные. Он может обнаруживать орфографические ошибки, порядок слов, синонимы и все такое, чтобы исправить запросы. Теперь исправление хвостового запроса имеет смысл для большинства. Это не всегда имеет смысл для запросов о торсе. Особенно, когда кто-то явно интересуется темой. Как с мисс Харрис. Она ищет красный чехол для iPad. Поэтому мы не хотим менять это на чехлы для iPad. Она знает, чего хочет, и ей совсем неинтересно смотреть на все остальные чехлы для iPad.Просто узнав нас и наши модели поведения, машины смогут сократить все моменты, когда закатываются глаза: «Вау, я не это имел в виду».

Потому что, очевидно, я не имел в виду, что хочу заняться фехтованием, хотя это выглядит довольно круто.

Что это? Парировать? До следующего раза, en garde!

Миозин V от головы до хвоста

Cell Mol Life Sci. Авторская рукопись; доступно в PMC 1 мая 2009 г.

Опубликован в окончательной редакции как:

PMCID: PMC2613318

NIHMSID: NIHMS83461

Kathleen M.Trybus

Департамент молекулярной физиологии и биофизики, 149 Бомонт-авеню, Вермонтский университет, Берлингтон, Вермонт 05405

Кэтлин М. Трибус, Департамент молекулярной физиологии и биофизики, 149 Бомонт-авеню, Вермонтский университет, Берлингтон, Вермонт 05405;

Окончательная отредактированная версия этой статьи издателем доступна на Cell Mol Life Sci. См. Другие статьи в PMC, в которых цитируется опубликованная статья.

Abstract

Myosin V (myoV), процессивный переносчик грузов, возможно, был наиболее хорошо изученным нетрадиционным миозином последнего десятилетия.Значительная структурная информация доступна для моторного домена, мотивов IQ со связанным кальмодулином или легкими цепями и глобулярного хвоста, связывающего груз, все из которых были кристаллизованы. Репертуар адаптерных белков, которые связывают myoV с конкретным грузом, становится все более понятным, что позволяет анализировать процессы клеточного транспорта. MyoV является процессивным, что означает, что он совершает много шагов по актиновым филаментам без диссоциации. Его удлиненное плечо рычага обеспечивает длину шага 36 нм, что делает его идеальным для исследования процессивного движения с помощью отдельных молекул.Кроме того, электронная микроскопия выявила структуру неактивной складчатой ​​конформации myoV, когда он не транспортирует груз. В этом обзоре представлена ​​предыстория myoV и освещены недавние открытия, которые показывают, почему myoV будет продолжать оставаться в центре внимания исследований.

Ключевые слова: миозин V, моторный белок, мотив IQ, связывание груза, процессивность, кальмодулин

Биологическая роль

MyoV обеспечивает непрерывный транспорт органелл, мембранного груза, секреторных везикул, мРНК, липидов и белковых везикул на актиновых дорожках [1], тогда как кинезин и динеин предоставляют сравнимые услуги на треках микротрубочек.Миозины класса V обнаруживаются в таких примитивных организмах, как дрожжи, которые содержат два миозина класса V. У человека существует три миозина класса V (Va, Vb и Vc), каждый с различной тканевой специфичностью, которые связаны со специфическим набором событий мембранного переноса [2]. MyoVa в первую очередь экспрессируется в головном мозге и меланоцитах. Мыши, лишенные myoVa, имеют аберрантную окраску шерсти из-за дефектов в перемещении меланосом и умирают через несколько недель из-за неврологических припадков [3]. У людей с дефектами myoVa или белков, которые действуют как адаптеры между myoVa и грузом, развивается синдром Гричелли, заболевание, характеризующееся дефектами пигментации и неврологическими симптомами [4].MyoVb и myoVc в первую очередь экспрессируются в эпителиальных клетках и участвуют в качестве моторов, участвующих в рециркуляции эндосом [2, 5, 6]. MyoV и связанные с ним грузы, таким образом, являются ключевыми компонентами антероградных транспортных путей, которые перемещают и / или закрепляют груз вблизи периферии клетки.

Обзор

MyoV можно разделить на четыре основных структурных домена (). Моторный домен содержит актин-связывающий сайт и нуклеотид-связывающий сайт, за которым следует протяженное плечо α-спирали длиной 24 нм, которое стабилизируется связыванием шести кальмодулинов (CaM) или связанных легких цепей.Плечо рычага усиливает небольшие нуклеотид-зависимые изменения, которые происходят в активном центре, позволяя произойти большому силовому удару после гидролиза АТФ. Далее следует область стержня, которая содержит области α-спиральной спиральной спирали, ответственной за димеризацию молекулы. На С-конце находится глобулярный хвост, который связывает адаптерные белки, которые связывают myoV с грузом ().

(A) Доменная структура myoVa. На N-конце моторный домен содержит сайт связывания актина и сайт связывания нуклеотида, за которым следует плечо рычага длиной около 24 нм, которое связывает шесть кальмодулинов (CaM) или родственные легкие цепи.Стержневая область myoVa содержит три участка α-спиральной спиральной спирали, которые прерываются двумя основными областями нескрученной спирали. На С-конце глобулярный хвост связывает адаптерные белки, которые связывают его с грузом.

(B) Рецепторный комплекс меланосом для myoVa. Связывание myoV с С-концевой областью меланофилина требует наличия как глобулярного хвоста, так и альтернативно сплайсированного экзона F в стержне. Экзон F присутствует в меланоцитах, но не в myoVa головного мозга. Меланофилин соединяет myoVa с меланосомами посредством взаимодействия с Rab27a в GTP-связанном состоянии.Рисунок адаптирован из ссылки [38].

(C) Общая модель процессивного движения. Начиная с состояния 1, обе головки прочно связаны с актином с АДФ в активном сайте. Задняя головка находится в состоянии после сильного удара, а ведущая головка находится в напряженном состоянии перед сильным ударом. Задняя головка высвобождает АДФ на ≈12 сек ^-1 (k ₁ ), на этапе ограничения скорости цикла АТФазы (состояние 2). АТФ связывается с задней головкой и отделяет ее от актина, позволяя прикрепленной головке завершить свой силовой удар.В то же время отделенная головка выталкивается вперед, гидролизует АТФ и становится новой ведущей головкой в ​​конформации перед сильным ударом (состояние 3). Отделенная голова подвергается диффузионному поиску следующего сайта связывания актина, высвобождает P _i и претерпевает переход в состояние сильного связывания. Состояние 1 ‘показывает, что ведущая головка может пройти через состояние изомеризованного ADP *, прежде чем вернуться в состояние 1 [70]. Темно-серые мономеры актина расположены на расстоянии ~ 36 нм друг от друга, чтобы проиллюстрировать размер каждой ступени.Рисунок адаптирован из ссылки [10].

MyoV — это процессивный мотор, использующий ручной механизм, чтобы продвигать его вперед на множество шагов по 36 нм перед диссоциацией от актина. В связанном состоянии с двумя головками задняя головка находится в состоянии после сильного удара, а ведущая головка находится в напряженном состоянии перед сильным ударом (). Длительные пробеги достигаются путем координации шагов двух головок посредством внутримолекулярной деформации, так что ведущая головка не диссоциирует преждевременно. Когда задняя головка диссоциирована АТФ, связанная головка завершает свой ход мощности.Отделенная головка выталкивается вперед, повторно переводит плечо рычага в состояние, предшествующее силе удара, и ищет следующий сайт связывания актина. Таким образом, моторно-грузовой комплекс движется вперед по актину.

Моторный домен

Общая структура моторного домена myoV подобна структуре ранее кристаллизованных моторов (). Тем не менее, он выявил несколько новых особенностей, которые показывают, почему сильное связывание с актином и сильное связывание с АТФ являются взаимоисключающими. Первая кристаллическая структура myoV была получена в отсутствие нуклеотида [7, 8].Впервые большая внутренняя щель, которая разделяет интерфейс связывания актина, была полностью закрыта из-за Ван-дер-Ваальса и специфических взаимодействий боковых цепей между остатками по обе стороны от щели (так называемые верхний и нижний домены 50 кДа) . Это закрытие объединило элементы интерфейса связывания актина по обе стороны от щели, что согласуется с ожидаемой высокой аффинностью безнуклеотидного состояния к актину. Основная структурная перестройка, необходимая для закрытия щели, заключалась в большом искажении внутреннего семинитевого бета-листа и большом повороте верхнего домена 50 кДа.Семинитевой бета-лист вместе с ассоциированными петлями и линкерами был придуман как «преобразователь» (правая панель). Эти перемещения доменов реструктурировали элементы связывания нуклеотидов (P-петля, переключатель 1 и переключатель 2), так что они больше не могут строго координировать нуклеотид. Полное закрытие щели, наблюдаемое с myoV без нуклеотидов даже в отсутствие актина, может способствовать переходу в состояние сильного связывания, что является важной особенностью для процессивного мотора. Напротив, кристаллы, полученные с аналогом АТФ, АДФ.BeF _x показал, что нуклеотид-связывающие элементы были перемещены для координации АТФ, и при этом расщелина снова открывается, в то время как плечо рычага остается в нижнем положении после удара силы.

Кристаллические структуры доменов myoV

(A) Ленточная диаграмма безнуклеотидного myoV (PDB, 1oe9). (Слева) Обзор комплекса моторный домен-легкая цепь (LC) в отсутствие нуклеотида, который является структурной моделью для состояния строгого связывания.(Справа) Увеличенный вид области преобразователя, которая является центральной областью моторной области рядом с активным участком. Он включает последние 3 нити 7-нитевого β-листа (пурпурный и желтый) и другие области, которые приспосабливают искажения, возникающие между состояниями окоченения и пост-окоченения, включая петлю 1 (отсутствующие остатки, соединяющие зеленые концы), и выпуклость между шестью и седьмой β-нитями. Закрытие актин-связывающей щели неожиданно искажает центральный β-лист и значительно изменяет активный сайт, так что он не может связывать нуклеотид.

(B) Ленточная диаграмма апо-СаМ, связанного с первыми двумя мотивами IQ мышиного myoV (PDB, 2i × 7). Два мотива IQ показаны на синей ленте. Некоторые из боковых цепей консенсусных остатков мотива IQ (IQxxxRGxxxR) показаны в виде стержней. Для первого мотива, который связывает окрашенный в оранжевый цвет CaM, показаны оба консенсусных остатка Arg. Консенсусный Gln и первый Arg (положение 6 мотива) показаны для второго мотива IQ. Консенсусные остатки в каждом мотиве IQ не демонстрируют одинакового взаимодействия с CaM.Каждая из двух долей CaM состоит из четырех спиралей. Четыре сайта связывания кальция, каждый из которых образован петлей, соединяющей пару α-спиралей, в этой структуре не заняты. CaM может связываться с мотивом IQ в отсутствие кальция, потому что C-доля находится в полуоткрытой захватывающей конформации, которая связывает первую половину консенсусной последовательности. N-доля находится в закрытой, не захватывающей конформации, которая более слабо взаимодействует со второй половиной мотива IQ. Это отличается от несвязанного апо-CaM, в котором закрыты как N-доля, так и C-доля.

(C) Ленточная диаграмма глобулярного хвоста Myo2p, миозина класса V из почкующихся дрожжей (PDB, 2f6h). Общая конструкция состоит из двух пятиспиральных пучков, соединенных петлями разного размера. Длинная центральная спираль (H6) соединяет два субдомена, показанных синим (субдомен 1) и зеленым (субдомен 2). Остатки, изображенные в изображении заполнения пространства, участвуют в связывании вакуолей (голубой) или в связывании секреторных везикул (светло-зеленый). Обратите внимание, что два сайта связывания находятся на противоположных сторонах глобулярного хвоста.

Электронная криомикроскопия актиновых филаментов, декорированных myoV, дополнительно предоставила модели связанного с актином моторного домена myoV. Кристаллические структуры стыкованы с трехмерными реконструкциями для создания атомных моделей acto-myoV [9]. Относительно высокое сродство моторного домена myoV к актину в так называемых состояниях «слабого связывания» (с ATP или ADP.P _i в активном сайте) было использовано для получения двух новых состояний, связанных с актином. В присутствии АТФ длинная щель, разделяющая актин-связывающую область моторного домена, открывается и эффективно разрушает интерфейс сильного связывания, оставляя плечо рычага в конформации, направленной вниз после удара силы.Эта и описанные выше кристаллические структуры обеспечивают структурный механизм, объясняющий, как АТФ диссоциирует миозин от актина. Второе новое связанное с актином состояние, полученное с помощью нуклеотидных аналогов (AMP-PNP или ADP.AlF ₄ ), впервые показало, что плечо рычага находится в восходящей конформации перед силовым ударом, которое было бы занято до фосфатирования. выпуск [9].

Была также установлена ​​важность петли 2 как связующего звена, помогающего поддерживать контакт с актином. Петля 2 представляет собой поверхностную петлю на границе связывания актина, которая участвует в начальном слабом электростатическом взаимодействии миозина с актином.Он неупорядочен в несвязанных кристаллических структурах, но становится упорядоченным, когда myoV связывается с актином [9]. Плотность петли 2 на актине реконфигурируется при изменении состояния нуклеотида. Мутационные исследования показали, что чистый положительный заряд петли 2 играет роль в определении продолжительности последовательного цикла. Уменьшение положительного заряда в петле 2 приводит к тому, что процессивные циклы завершаются раньше, чем с myoV дикого типа, в то время как увеличение чистого положительного заряда петли 2 увеличивает длину циклов [10]. Эти наблюдения предполагают, что высокое сродство к актину в состоянии слабого связывания, опосредованное петлей 2, позволяет отделенной головке процессивно перемещающегося myoV с большей легкостью находить свой следующий сайт связывания и продолжать процессивный бег.

Плечо рычага

Плечо myoV содержит шесть мотивов IQ, каждый с консенсусной последовательностью IQxxxRGxxxR, где x обозначает любую аминокислоту. Число аминокислот между соседними мотивами колеблется от 23 до 25, так что плечо рычага можно описать как три пары мотивов IQ. Каждый мотив связывает CaM или родственные легкие цепи, которые не сохранили функциональные сайты связывания кальция. CaM имеет четыре высокоаффинных сайта связывания кальция, называемых EF-руками, каждый из которых состоит из двух α-спиралей, соединенных петлей связывания кальция.Мышиный миозин Va, выделенный из ткани, связывает только СаМ [11], тогда как миозин, выделенный из головного мозга курицы, содержит как СаМ, так и специфическую легкую цепь из семейства основных легких цепей (называемых L17 или L23) [12-14]. На основании анализа протеолитических фрагментов myoVa, очищенных из головного мозга цыплят, был сделан вывод о том, что специфическая легкая цепь не связывается с IQ-мотивом один или два [14]. Напротив, при экспрессии in vitro первый мотив IQ может связываться либо с СаМ, либо с конкретной легкой цепью, показывая, что специфичность мотива IQ для конкретной субъединицы не является все-или-никакой.Этот результат ставит вопрос о том, может ли субъединица, которая занимает данный мотив IQ, варьировать in vivo , в зависимости от уровней экспрессии соответствующих легких цепей.

Почему имеет значение, связывается ли CaM или легкая цепь с конкретным мотивом? Во-первых, кальций может воздействовать только на те области плеча рычага, с которыми связан CaM. Во-вторых, кинетический анализ показал, что присутствие легкой цепи, смежной с моторным доменом, изменяет константы скорости, так что состояние M.ADP.P _i является предпочтительным по сравнению с тем, когда СаМ связывается в этом положении [15].Исследование одиночных молекул, в котором одна головка myoV была помечена наночастицей золота, показало, что повторное связывание свободной головки во время последовательного прогона происходило в три раза медленнее, когда CaM был связан исключительно с плечом рычага, по сравнению с тем, когда легкая цепь также была связана [16]. Это могло бы дать свободной голове больше времени, чтобы найти свой следующий сайт связывания с актином и продолжить процессивный прогон, что может быть полезным in vivo , учитывая сложную природу внутриклеточной среды.

Были определены кристаллические структуры нескольких мотивов IQ Myo2p (миозин класса V из почкующихся дрожжей Saccharomyces cerevisiae ) в комплексе с легкой цепью Mlc1p.В отличие от CaM, Mlc1p не связывает кальций. Структура Mlc1p, связанного с одиночными мотивами IQ (два и четыре) [17], и с парой из двух-трех [18], позволила предложить модель для всего плеча рычага. Один из выводов заключался в том, что существует небольшое взаимодействие между парами IQ-мотивов, подразумевая, что области между вторым и третьим или четвертым и пятым IQ-мотивами могут обеспечивать шарнирную область, позволяющую плече рычага изгибаться в конформацию телемарка, наблюдаемую в электроне. микроскопические изображения [19].Последующее молекулярно-динамическое моделирование мотивов IQ подтвердило, что последовательность четвертого мотива IQ может нести гибкий сустав, который обеспечивает эластичность плеча рычага myoV [20]. Второй вывод кристаллографических исследований состоял в том, что N-доля Mlc1p не взаимодействует с мотивами IQ 4 и 6, оставляя ее свободной для потенциального взаимодействия с др. Партнером по связыванию. ЯМР исследования также показали, что MLC1p также связывается с первым IQ мотивом Myo2p только через свою C-долю, оставляя N-долю свободной для связывания с др. Мишенью [21].Напротив, CaM связывается с IQ1 обеими долями на основании исследований флуоресцентного резонансного переноса энергии [18]. Различное поведение CaM и Mlc1p по отношению к первому мотиву IQ Myo2p, по-видимому, связано как с уникальными структурными особенностями N-доли Mlc1p, в частности, с пятой D’-спиралью, которая стабилизирует структуру закрытых долей, так и с точным последовательность мотива IQ [21]. Эти разные способы связывания могут объяснить, почему Mlc1p выполняет важную функцию для нацеливания на пузырьки, которая не разделяется CaM.У позвоночных myoV также было высказано предположение, что плечо рычага может участвовать в связывании др. Белков. MyoV на синаптических пузырьках взаимодействует с синтаксином-1A, t-SNARE, участвующим в экзоцитозе [22]. В случае позвоночных синтаксин связывается с мотивом IQ, от которого диссоциировал CaM, а не со свободной долей легкой цепи, как предполагается для дрожжевого myoV.

Нетрадиционные миозины необычны тем, что CaM наиболее сильно связывается с мотивами IQ при отсутствии кальция. Как это достигается, учитывая, что CaM обычно связывается со своими целевыми пептидами только в присутствии кальция? Кальций заставляет две доли CaM принимать открытую, захватывающую конформацию, которая связывает цели, содержащие основную амфифильную спираль.Две доли апо-СаМ, напротив, принимают закрытую конформацию без захвата [23, 24]. Кристаллическая структура СаМ, связанного с первыми двумя мотивами IQ мышиного myoV, разрешила этот парадокс. Структура показала, что C-концевая доля апо-CaM принимает полуоткрытую конформацию, которая захватывает первую часть консенсусной последовательности IQ (IQxxxR), в то время как закрытая N-концевая доля более слабо взаимодействует со второй половиной консенсусной последовательности. последовательность (GxxxR) [25] (). Неожиданным открытием было то, что неконсенсусные остатки мотива играют ключевую роль в точном позиционировании двух долей CaM, в результате чего консенсусные остатки каждого мотива по-разному взаимодействуют с CaM по длине плеча рычага.

Кальций оказывает два эффекта на СаМ, связанный с мотивом IQ в плече рычага. Низкие микромолярные концентрации кальция разворачиваются и активируют подавленное состояние myoV (обсуждается в следующем разделе). Более высокие концентрации кальция действуют как «тормоз». Подвижность in vitro прекращается [26], и процессивные пробеги одиночных молекул myoV прекращаются [27]. Основанием для ингибирования является диссоциация связанного CaM, в результате чего плечо рычага становится податливым и неспособным передавать информацию, зависящую от напряжения, между головками.Несколько линий доказательств предполагают, что CaM диссоциирует от мотива 2 IQ при высокой концентрации кальция [14, 28]. Электронная криомикроскопия также показала, что кальций вызывает основную перестройку связанного СаМ [28]. Степень, в которой кальций влияет на функцию in vivo , неизвестна.

Другая роль длинного плеча рычага состоит в том, чтобы позволить myoV совершать шаги на 36 нм вдоль актина, что равно псевдоповторению актиновой спирали. Хорошо известно, что размер шага мономерных конструкций myoV, содержащих от одного до шести мотивов IQ, увеличивается с увеличением длины плеча рычага [29-31].В двуглавых конструкциях было также показано, что размер шага myoV определяется длиной шейки, а не псевдоповтором актинового филамента [31]. Рабочий ход 25 нм мономера, содержащего полное плечо рычага с 6 мотивами IQ, однако, меньше, чем шаг в 36 нм, выполняемый процессивно шагающим двухголовым двигателем 6IQ. Это означает, что шаг 36 нм нативной молекулы представляет собой комбинацию рабочего хода (25 нм) связанной головки и смещенного, термически управляемого диффузионного движения (11 нм) свободной головки к следующему сайту связывания актина [32 ].Дальнейшие доказательства в пользу того, что myoV активно перемещает груз с помощью рычажного механизма, были получены в исследовании на живых дрожжах. Мутанты Myo2p (дрожжевой миозин класса V) с различной длиной плеча рычага заставляли секреторные пузырьки перемещаться к месту экзоцитоза со скоростью, которая коррелировала с длиной плеча рычага [33]. Это активное перемещение груза с помощью myoV у почкующихся дрожжей контрастирует с механизмами пассивного захвата и привязки, предложенными для myoV в меланоцитах, где двигатели на основе микротрубочек являются первичными активными двигателями на большие расстояния [34, 35].

Область стержня

Область стержня лежит между мотивами IQ и глобулярным хвостом и содержит различные количества последовательности со склонностью к образованию α-спиральной спиральной спирали. В myoVa есть три основных участка спиральной спирали с двумя прерываниями (). Склонность к образованию α-спиральной спиральной спирали основана на силе гептадного повтора, мотива из семи аминокислот, в котором первое и четвертое положения, которые образуют внутренний шов спиральной спирали, являются гидрофобными аминокислотами.Палочка myoVa имеет всего ∼60 гептадных повторов coiled-coil, и первые ∼20 гептадных повторов до того, как сайт PEST станет достаточным для обеспечения димеризации. Димерные конструкции, усеченные непосредственно перед сайтом PEST, называются myoV-HMM (тяжелый меромиозин по аналогии с протеолитическими субфрагментами обычного миозина класса II). Первое прерывание в спиральной спирали — это сайт PEST, который содержит аминокислоты Pro (P), Glu (E), Ser (S) и Thr (T). Эта область может быть расщеплена in vitro протеазой кальпаином [36], хотя ее роль in vivo не известна.Обычно считается, что сайты PEST уменьшают период полураспада белков, которые их содержат. Преимущество быстрого оборота для myoV неясно, если этот процесс нельзя регулировать. MyoVc не имеет этого сайта PEST [2].

Две другие основные области coiled-coil следуют за сайтом PEST в myoVa (одна с ≈12 гептадами, другая с ≈20 гептадами), прерванная разрывом на ≈80 аминокислот. Область хвоста после сайта PEST содержит экзоны A-F, три из которых (B, D и F) попеременно сращиваются в разных тканях, давая начало множеству изоформ.Некоторые, но не все из этих экзонов содержат гептадные повторы. Изоформа, преобладающая в головном мозге, содержит экзоны A, B, C и E, а в меланоцитах — A, C, D, E и F [37]. Экзон F необходим для взаимодействия с меланосомами [38]. Это был первый пример, показывающий, что использование альтернативного экзона в стержне может помочь специфицировать определенные грузы в дополнение к сайтам связывания грузов в глобулярном хвосте. Специфический для мозга экзон B содержит только три аминокислоты (DDK), но необходим для связывания легкой цепи с массой ≈10 кДа в семействе динеинов, называемых DYNLL2 [39, 40], который очищается совместно с myoVa, выделенным из головного мозга цыплят [13] .Спектроскопические исследования показали, что связывание DYNLL2 увеличивает содержание альфа-спиральной спиральной спирали в области вокруг его сайта связывания. Кроме того, было высказано предположение, что DYNLL2 действует как адаптер между myoVa и различными грузами, такими как преапоптотический белок Bmf [41] и постсинаптический каркасный белок GKAP (белок, связанный с гуанилаткиназным доменом) [42].

Домен глобулярного хвоста

С-конец ≈400 аминокислот myoV включает домен глобулярного хвоста, который выполняет две известные роли, а именно связывание груза через карго-специфические рецепторы и стабилизацию свернутой, ингибированной конформации myoV через взаимодействие с двигательной сферой.Глобулярный хвост Myo2p (миозина дрожжевого класса V) состоит из двух функциональных доменов, которые определяют вакуоль-специфический или специфический для секреторных пузырьков груз [43]. Мутационные исследования выявили аминокислоты, которые влияют только на один или другой из этих процессов [44]. Эти наблюдения получили структурную основу после кристаллизации домена глобулярного хвоста () [45]. Хвост состоит из двух пятиспиральных пучков, соединенных общей длинной спиралью. Точечные мутации, которые нарушают кластер связывания Vac17p вдоль подвергнутой воздействию растворителя поверхности спирали 6.Сайт связывания секреторных пузырьков, основной груз Myo2p, был картирован в отдельном месте в субдомене 2, который не перекрывался с областью связывания вакуоли. Эти два участка находятся на противоположных концах шарового хвоста и смещены примерно на 180 °. Обе эти области являются высококонсервативными, подразумевая, что они также могут связывать специфические рецепторы органелл в myoV от высших организмов. Дополнительные консервативные участки остатков распределяются по поверхности и могут определять другие сайты связывания рецептора.

Адаптерные белки, которые связывают миозин V с грузом

Меланосомы являются наиболее хорошо изученным грузом myoVa млекопитающих. Мутации у мышей со светлой окраской шерсти выявили три белка, которые необходимы для успешного перемещения меланосом. Фенотип разбавленного возникает в результате мутаций в глобулярном хвосте или моторном домене myoV [46], фенотип lead — из мутаций в меланофилине (также называемом Slac2-a) [47], а фенотип ashen возникает из-за дефектов. в Rab27a, небольшой GTPase надсемейства Ras [48].Эти три белка составляют транспортный комплекс, специфичный для органелл (). Rab27a локализуется на мембране меланосомы и в своей GTP-связанной форме привлекает к ней меланофилин, который связывается с хвостом myoVa зависимым от экзона F способом [38, 49, 50]. Требование наличия GTP-связанной формы Rab обеспечивает регулирующую контрольную точку для образования / растворения грузового комплекса. Меланофилин имеет N-концевой эффекторный домен Rab27a и C-концевую область связывания myoV (глобулярный хвост и экзон F).Участие альтернативно сплайсированных экзонов в связывании грузов позволяет механизму выбирать больше альтернативных грузов, чем было бы возможно, если бы участвовал только глобулярный хвост. Глобулярный хвост myoVa связывается с внутренне неструктурированным доменом меланофилина [51]. Почему такая область будет использоваться для связывания, не ясно, но одна возможность состоит в том, что она обеспечивает сайт для быстрой деградации после доставки груза в дополнение к сайту PEST, который содержит меланофилин. MyoVa, меланофилин и доминантно активный GFP-tagged Rab27a были реконструированы in vitro и, как было показано, образуют транспортный комплекс, который процессивно перемещается по актину [52].

Общность грузового комплекса была продемонстрирована с помощью myoVb, где Rab-связывающий белок, называемый FIP2, действует как адаптер между миозином и Rab11a, GTPase, которая связывается с рециркулирующими эндосомами, грузом myoVb [53, 54]. Rab8a недавно был вовлечен в неклатрин-зависимый эндоцитоз и рециклинг с помощью myoVb [55]. Другой хорошо охарактеризованный комплекс — это вакуоль-специфический рецепторный комплекс для Myo2p (миозина дрожжевого класса V), который состоит из вакуолярного мембраносвязанного белка Vac8p и адаптивного белка Vac17p, который связывает Vac8p с миозином.Ни один из белков Vac не является Rab. Либо дополнительные партнеры по связыванию еще предстоит идентифицировать, либо этот комплекс отличается от версии у млекопитающих. Связь между Myo4p (еще один миозин дрожжевого класса V) и его грузом также хорошо установлена. Myo4p транспортирует более 20 различных мРНК и кортикальный эндоплазматический ретикулум к дрожжевой почке по актиновым кабелям. She3p действует как адаптер между Myo4p и She2p, который связывает груз мРНК (rev. [56]).

Выбор и доставка груза

Миовиаловирусы млекопитающих и дрожжей имеют несколько грузов.Присутствие множества сайтов связывания рецепторов на глобулярном хвосте поднимает вопрос о том, как выбирается конкретный груз. Одна возможность состоит в том, что конкретный специфический для органелл рецептор экспрессируется только тогда, когда это необходимо в клеточном цикле, чтобы предотвратить конкуренцию между грузами. У почкующихся дрожжей уровень белка Vac17p изменяется с клеточным циклом и, вероятно, является триггером, который контролирует начало движения вакуолей [57]. С другой стороны, глобулярный хвост может претерпевать конформационные изменения, открывая только один сайт за раз.Такой механизм был предложен для глобулярного хвоста растительного миозина XI, где было предположено, что два домена глобулярного хвоста чередуются между разными конформациями в растворе, и что связывание органелл выбирает и стабилизирует конкретную конформацию [58]. Связывание одного груза может тогда стерически исключить связывание другого груза. Фосфорилирование с помощью кальций / кальмодулин-зависимой протеинкиназы II, как было показано, регулирует прикрепление груза в ооцитах Xenopus зависимым от клеточного цикла способом, при этом фосфорилирование приводит к отсоединению груза от мотора [59].Общность фосфорилирования как регуляторного механизма не установлена.

Как груз узнает, куда нужно доставить? Одна из стратегий заключается в регулируемой деградации транспортного комплекса, когда он прибывает в нужное место. Для комплекса вакуолей, состоящего из Myo2p / Vac17p / Vac8p у почкующихся дрожжей, как только вакуоль должным образом откладывается около центра зачатка, Vac17p разрушается посредством PEST-зависимой последовательности [57]. Удаление последовательности PEST внутри Vac17p вызывает обратное движение вакуолей, заставляя их неправильно локализоваться на шейке между материнской клеткой и почкой.Меланофилин также содержит сайт PEST, последовательность, которая может определять быстрый обмен белка [60]. Мутантный меланофилин, лишенный сайта PEST, неправильно локализует меланосомы в меланоцитах, предполагая, что деградация может быть необходимым элементом для локализации. Регулируемое нарушение транспортного комплекса может быть общим механизмом депонирования органелл в их надлежащем месте назначения. Конечное место назначения также может быть указано путем связывания с якорным белком, который расположен в правильном месте назначения.

Процессивность: активный мотор

MyoV был первым миозином, идентифицированным как процессивный, что означает, что он совершает несколько шагов на своем пути без диссоциации [61]. Хотя было предложено много детальных моделей для объяснения процессивного движения myoV (рассмотрено в [62]), минимальная модель, которая описывает существенные особенности, показана на. Произвольно начиная с обеих головок в связанном состоянии ADP, задняя головка высвобождает ADP приблизительно через 12 секунд ^-1 , шаг ограничения скорости в цикле [63].АТФ связывает и диссоциирует заднюю головку, позволяя ограниченной ведущей головке завершить свой силовой удар и высвободить накопленную упругую энергию. Отделенная головка гидролизует АТФ, повторно переводит плечо рычага в положение перед сильным ударом и связывается со следующим участком связывания актина в качестве новой ведущей головки. Высвобождение фосфата происходит быстро [63], и молекула возвращается в исходное положение с АДФ, связанным с каждой головкой. Также были предложены разветвленные или альтернативные кинетические пути во время процессивного движения, которые различаются порядком, в котором ведущая и замыкающая головы принимают разные состояния нуклеотидов [64, 65].

Несколько функций оптимизируют процессивность myoV. Одна головка всегда должна оставаться связанной с актиновой нитью. Следовательно, моторный домен должен иметь высокий рабочий цикл, а это означает, что он проводит большую часть своего времени прикрепленным к актину в состоянии сильного связывания. Это происходит потому, что этапом ограничения скорости в цикле АТФазы является высвобождение MgADP из связанной с актином головки со скоростью ≈12 сек. ^-1 [63]. Вторая особенность — высокое сродство к актину в состояниях слабого связывания (АТФ или АДФ.P _i в активном сайте) [66, 67], что, вероятно, увеличивает способность новой ведущей головки находить свой следующий сайт связывания, как предполагают мутационные исследования [10, 68]. В-третьих, зависимые от напряжения изменения кинетики двух головок достигаются за счет длинных плеч рычагов, которые соединяют два моторных домена. Эта функция координирует две головки, так что их кинетические циклы не совпадают по фазе. Внутримолекулярная деформация может ускорить скорость высвобождения АДФ из задней головки, ингибировать скорость высвобождения АДФ из ведущей головки или их комбинацию.Ключевой особенностью является предотвращение преждевременного отделения ведущей головки. Скорость высвобождения АДФ из ведущей головки оказывается наиболее подверженной влиянию, хотя это все еще обсуждается [69-72]. Ясно, что кинетика, зависящая от деформации, необходима для увеличения продолжительности обработки [32].

Подходы с использованием одной молекулы установили, что механизм поступательного движения является ручным, что означает, что задняя и ведущая головки меняют положение с каждым шагом [73, 74]. Меньше известно о промежуточном звене, которое встречается как задняя головка. освобождает от актина, чтобы стать новой висящей головой.Наночастицы золота, прикрепленные к плечу рычага, позволяли отслеживать движение свободной головки с субмиллисекундным разрешением [16]. Результаты показали, что несвязанная головка может свободно вращаться вокруг соединения рычаг-плечо в поисках следующего сайта связывания актина. В альтернативном подходе отслеживали движения жесткого стержня (флуоресцентной микротрубочки), прикрепленного к плечу рычага, чтобы показать, что свободная головка претерпевает броуновское движение во всех направлениях, прежде чем стать новой ведущей головкой [75].Повороты на девяносто градусов, связанные с отсоединением и повторным связыванием головок с актином, также, как полагают, происходят из-за термического скручивания шеи во время шага 36 нм [76]. Эти особенности, вероятно, облегчают движение myoV через переполненные актиновые сети в коре клеток, максимизируя вероятность того, что новая ведущая головка найдет свой следующий сайт связывания актина.

В какой степени можно разрешить отдельные стадии myoV in vivo ? При отслеживании карго-меланосомы в меланоцитах Xenopus с точностью 2 нм наблюдались ступеньки с распределением около 35 нм, такие же, как у in vitro [77].Скорость была ниже, чем ожидалось на основании исследований in vitro , но последующие эксперименты показали, что промежуточные филаменты могут быть ответственны за препятствование транспорту myoV за счет увеличения вязкого сопротивления [78]. Это последнее исследование также показало некоторые ограниченные данные о переключении треков in vivo , что открывает дверь для дальнейших исследований этого важного процесса.

Сложенный миозин V: заторможенное состояние

Важнейшей особенностью любого мотора является то, как его активность выключается, когда он не перемещает активно груз.Гидродинамические данные предоставили первое свидетельство того, что myoV претерпевает изменение конформации при переходе из активного в ингибированное состояние [26, 79, 80]. Активное протяженное состояние осаждалось при ≈11S, в то время как заторможенная складчатая конформация осаждалась при ≈14S. Внутримолекулярное сворачивание, по-видимому, является обычным механизмом ингибирования активности моторных белков, поскольку сходный конформационный переход был показан ранее с миозином гладких мышц [81, 82] и кинезином [83].

Трехмерная структура свернутого мономера была определена двумя дополнительными методами электронной микроскопии.Двумерные массивы myoV на липидных монослоях обнаруживают повторяющийся мотив, который напоминает шестилепестковый цветок, каждый из которых состоит из свернутого мономерного myoV [84] (). Атомная модель структуры, построенная с использованием доступных кристаллических структур, показала, что myoV изгибается в месте соединения плеча рычага и стержня, так что двигательный домен взаимодействует с шаровидным хвостом, подобно тому, как человек касается пальцев ног. Глобулярный хвост взаимодействует с моторным доменом около петли 1 на входе в активный сайт, который находится далеко от сайта связывания актина, что позволяет предположить, что высвобождение продукта может быть напрямую ингибировано.Доминирующей особенностью конструкции были удлиненные рычаги, каждое из которых было связано с шестью связанными CaM. Оба плеча рычага ориентированы после силового удара, что позволяет предположить, что сложенная молекула может прочно связываться с актином. Область спиральной катушки смещена больше к одному плечу рычага, чем к другому. Были визуализированы приблизительно 21 нм спиральной спирали, что аналогично длине стержня перед участком PEST. «Отсутствующая» спиральная спираль, вероятно, представляет собой неупорядоченную структуру, составляющую пестик цветочного мотива.В соответствии с этой идеей, мутационное исследование пришло к выводу, что глобулярный хвост связывается с С-концом спиральной спирали непосредственно перед сайтом PEST, чтобы стабилизировать взаимодействие моторного домена и глобулярного хвоста, создавая треугольный вид, типичный для свернутого мономера [ 85]. Чтобы достичь этого, оставшаяся область стержня между сайтом PEST и шаровидным хвостом должна была бы загнуться в месте разрыва между оставшимися двумя областями спиральной спирали, что могло бы объяснить плотность в центре цветочного мотива.

Трехмерная структура myoV в свернутой, неактивной конформации

На вставке показан общий цветочный мотив, образованный двумерными массивами myoV [84]. Каждый лепесток мотива (пунктирная рамка) обозначает один сложенный мономер. На большем изображении смоделированы кристаллические структуры. Ключевой особенностью является то, что молекула изгибается в месте соединения плеча рычага и стержня, что позволяет моторным доменам (пурпурному и красному) взаимодействовать с шаровидным хвостом (желтым и оранжевым).Сайт взаимодействия находится рядом с петлей 1 на входе в сайт связывания нуклеотидов (окрашены в синий и зеленый цвет на моторном домене), обеспечивая механизм, посредством которого активность ингибируется. Мотивы IQ окрашены так же, как их соответствующие моторные области, а CaM — зеленым. Наблюдаемая длина стержня (голубой) примерно равна длине между плечом рычага и местом PEST. Рисунок адаптирован из [93].

Анализ одиночных частиц отрицательно окрашенных свернутых молекул myoV выявил структуру, аналогичную описанной выше [86].Приблизительно одна треть от всей предсказанной области спиральной спирали была четко видна, головы были в конформации после силового удара, а место взаимодействия глобулярного хвоста и моторного домена было далеко от сайта связывания актина. Кластер консервативных кислотных остатков в голове, около входа в сайт связывания нуклеотидов (между остатками P117 и P137), был идентифицирован как область, которая может взаимодействовать с основным кластером в глобулярном хвосте. Ионное взаимодействие согласуется с наблюдением, что высокая концентрация соли (0.3 M NaCl) нарушает сложенную конформацию и заставляет myoV принимать расширенную конформацию.

Регулируется только АТФаза полноразмерной конструкции myoV, поскольку более короткие конструкции не содержат всех структурных элементов, необходимых для образования свернутой конформации. Добавление глобулярного хвостового домена к усеченным конструкциям HMM восстанавливает ингибирование активности АТФазы и воссоздает треугольную структуру, которая напоминает свернутую конструкцию полной длины [85, 86]. Анализы устойчивого состояния актин-активируемой АТФазы показывают самое большее 10-кратное различие в активности между «включенным» и «выключенным» состояниями полноразмерного myoV, что не является очень жесткой регуляцией [26].На основании исследований регуляции других миозиновых моторов было установлено, что на скорость подавления может сильно влиять несколько нерегулируемых «мошеннических» молекул с высокой активностью АТФазы. Соответственно, эксперименты с одним оборотом, в которых каждый моторный домен обеспечивается только одной молекулой АТФ, являются лучшим способом точной оценки степени регуляции. С помощью этого метода было показано, что активность АТФазы свернутой конформации (≈0,2 сек ^-1 ) как минимум в 50 раз ниже, чем в расширенном состоянии (15 сек ^-1 ), степень регуляции должна быть эффективным in vivo [27].

Переход из заторможенного состояния в активное

При близкой к физиологической концентрации соли связывание с кальцием разворачивает молекулу в расширенное состояние, что сопровождается увеличением активности актин-активируемой АТФазы. Сложенная конформация не показывает стабилизирующего взаимодействия, непосредственно затрагивающего плечо рычага, так как же связывание кальция активирует молекулу? Электронная криомикроскопия показала, что кальций вызывает серьезную перестройку связанных CaMs в плече рычага [28], чего может быть достаточно, чтобы нарушить взаимодействие моторного домена с глобулярным хвостом и развернуть молекулу.

Альтернативный путь активации — связывание груза, учитывая, что связывание груза с глобулярным хвостом предположительно будет конкурировать с его взаимодействием с моторным доменом. Хотя с биологической точки зрения логично, что мотор следует активировать только тогда, когда это необходимо для транспортировки, это не было продемонстрировано напрямую. Связывание меланофилина, адаптивного белка для меланосом, увеличивало актин-активируемую АТФазу myoV примерно на одну треть по сравнению с кальцием. Эта активация наблюдалась только при концентрации соли (0.2 M KCl), где свернутый мономер был готов разворачиваться [87], подразумевая, что дополнительный фактор, вероятно, необходим для полной активации через этот путь.

Стратегии успеха в клетке

Цитоскелетный транспорт в клетках млекопитающих включает взаимодействия между процессирующими молекулярными моторами как на микротрубочках, так и на треках актина. В меланоцитах Xenopus гранулы пигмента перемещаются к центру клетки в процессе, называемом агрегацией, при этом они более равномерно распределяются по клетке во время диспергирования, вызывая изменение цвета кожи.Этот процесс требует переключения между треками цитоскелета в обоих направлениях [88]. Микротрубочки используются для дальнего, довольно линейного транспорта от ядра к периферии клетки и обратно, в то время как транспорт на основе актина короче и больше ограничен периферией клетки. Проведенная аналогия заключается в том, что микротрубочки — это магистрали в клетке, а дорожки актина — вторичные дороги.

Двигатели должны будут перемещаться по пересечениям на основе как микротрубочек-актин, так и актин-актин на своем пути.На уровне отдельной молекулы myoV эффективно управляет пересечениями актин-актин либо путем поворота на пересекающуюся актиновую нить (≈ половина времени), перешагивая через пересекающуюся актиновую нить (≈ одна треть времени), либо путем завершение [89]. Частота поворота по сравнению с перешагиванием может быть объяснена просто количеством сайтов связывания актина, потенциально доступных для ведущей головы для связывания в любой ситуации. Как описано ранее, несвязанная голова в поисках нового сайта связывания подвергается широкому диффузионному поиску в своем стремлении стать новой ведущей головой [16], и это то, что происходит на пересечении. Однако in vivo груз, скорее всего, будет содержать несколько двигателей. В Xenopus более 60 моторов myoV, по оценкам, присутствуют на одной меланосоме, хотя ожидается, что только некоторые из них будут задействованы одновременно [88]. Частота вращения с несколькими двигателями должна отличаться от случая с одним двигателем, и, вероятно, будет зависеть от относительного количества двигателей, которые задействованы с исходной дорожкой, по сравнению с числом, которые производят выборку пересекающейся дорожки [90, 91].

Каким образом груз, содержащий кинезин и myoV, выполняет микротрубочки для передачи актина? Одна из возможностей состоит в том, что в процесс участвует отслеживающий белок EB1 на плюс-конце микротрубочек [92].С-концевая область меланофилина, адапторного белка, связывающего myoVa, содержит сайт связывания для EB1. В принципе, это связывание может позволить меланофилину «путешествовать автостопом» по EB1 до конца микротрубочки, и в этот момент трехкомпонентный белковый транспортный комплекс, состоящий из myoVa, меланофилина и связанного с меланосомами Rab27a, может быть собран для транспорта на короткие расстояния на актиновых филаментах. . Другой возможный механизм для облегчения переноса груза между микротрубочками и актином основан на наблюдении, что myoV может подвергаться одномерному диффузионному поиску на микротрубочках in vitro .В этом не потребляющем энергии процессе myoV может сканировать микротрубочки на большие расстояния (> 1,5 мкм) в течение продолжительных периодов времени (> 45 секунд) из-за электростатического взаимодействия между петлей 2 в головке myoV и отрицательно заряженной областью. тубулина называется E-hook [89]. В принципе, этот диффузионный процесс может помочь myoV найти груз, который подвергается движению на основе микротрубочек, и, таким образом, облегчить плавный перенос, как только встречается пересечение микротрубочек и актина. Остается задача показать, работает ли какой-либо из этих процессов в ячейке, и определить дополнительные механизмы, которые могут облегчить транспортировку грузов по нескольким путям.

Остальные вопросы

Несмотря на все, что известно о myoV, многие вопросы все еще остаются. Полный спектр адаптерных белков, которые связывают двигатель с грузом, все еще находится в стадии открытия. Как функциональный транспортный комплекс формируется, а затем диссоциирует в нужное время и в нужном месте, не совсем понятно, но прогресс был достигнут с использованием системы почкующихся дрожжей, где ключевыми игроками можно легко манипулировать генетически. До сих пор не ясно, достаточно ли одного связывания груза для активации myoV из свернутой конформации и до какой степени кальций регулирует функцию myoV in vivo .Степень, в которой CaM по сравнению с конкретной легкой цепью или точная последовательность самих мотивов IQ, влияет на способность плеча рычага передавать напряжение моторным доменам, неизвестна. Функциональные взаимодействия между myoV и другими двигателями в клетке через их одновременное присутствие на одном и том же грузе — это область текущих исследований. Ясно, что в будущем еще много проблем, чтобы полностью понять сложный процесс перевозки грузов на основе myoV.

Благодарности

Я благодарю Алекса Ходжеса и Сьюзан Лоуи за полезные комментарии относительно рукописи.Эта работа финансировалась грантом NIH GM078097 для KT.

Сокращения

CaM

кальмодулин

LC

легкая цепь

myoV

миозин V

Ссылки

1. Рек-Петерсон С.Л., Провансер, Мерсер, Дж., Мус. Миозины класса V. Biochim Biophys Acta. 2000; 1496: 36–51. [PubMed] [Google Scholar] 2. Родригес О.К., Чейни RE. Человеческий миозин-Vc представляет собой новый миозин класса V, экспрессируемый в эпителиальных клетках. J Cell Sci. 2002; 115: 991–1004.[PubMed] [Google Scholar] 3. Мерсер Дж. А., Сеперак П. К., Стробель М. С., Коупленд Н. Г., Дженкинс Н. А.. Новая тяжелая цепь миозина, кодируемая локусом разбавленной окраски шерсти мыши. Природа. 1991; 349: 709–713. [PubMed] [Google Scholar] 4. Menasche G, Ho CH, Sanal O, Feldmann J, Tezcan I, Ersoy F, Houdusse A, Fischer A, de Saint Basile G. Синдром Грищелли, ограниченный гипопигментацией в результате дефекта меланофилина (GS3) или делеции F-экзона MYO5A ( GS1) J Clin Invest. 2003. 112: 450–456. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 5.Роланд Дж. Т., Кенуорти А. К., Перанен Дж., Каплан С., Голденринг-младший. Миозин Vb взаимодействует с Rab8a в трубчатой ​​сети, содержащей EHD1 и EHD3. Mol Biol Cell. 2007. 18: 2828–2837. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 6. Святецка-Урбан А, Талебиан Л., Канно Е., Моро-Маркиз С., Кутермарш Б., Хансен К., Карлсон К. Х., Барнаби Р., Чейни Р. Э., Лэнгфорд Г. М., Фукуда М., Стэнтон Б. А.. Миозин Vb необходим для передачи регулятора трансмембранной проводимости при муковисцидозе в Rab11a-специфических апикальных рециклирующих эндосомах в поляризованных эпителиальных клетках дыхательных путей человека.J Biol Chem. 2007. 282: 23725–23736. [PubMed] [Google Scholar] 7. Coureux PD, Wells AL, Menetrey J, Yengo CM, Morris CA, Sweeney HL, Houdusse A. Структурное состояние мотора миозина V без связанного нуклеотида. Природа. 2003; 425: 419–423. [PubMed] [Google Scholar] 8. Coureux PD, Sweeney HL, Houdusse A. Три структуры миозина V очерчивают важные особенности химио-механической трансдукции. Эмбо Дж. 2004; 23: 4527–4537. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 9. Фолькманн Н., Лю Х., Хейзелвуд Л., Кременцова Е.Б., Лоуи С., Трибус К.М., Ханейн Д.Структурная основа процессивного движения миозина v, выявленная с помощью электронной криомикроскопии. Mol Cell. 2005; 19: 595–605. [PubMed] [Google Scholar] 10. Ходжес А.Р., Кременцова Е.Б., Трибус К.М. Разработка продолжительности последовательного выполнения Myosin V. J Biol Chem. 2007. 282: 27192–27197. [PubMed] [Google Scholar] 11. Ван Ф., Чен Л., Аркуччи О, Харви Э. В., Бауэрс Б., Сюй Й., Хаммер Д. А., 3-й, Селлерс-младший. Влияние АДФ и ионной силы на кинетические и подвижные свойства рекомбинантного мышиного миозина V. J Biol Chem. 2000; 275: 4329–4335.[PubMed] [Google Scholar] 12. Cheney RE, O’Shea MK, Heuser JE, Coelho MV, Wolenski JS, Espreafico EM, Forscher P, Larson RE, Mooseker MS. Миозин-V головного мозга — это нетрадиционный двуглавый миозин с двигательной активностью. Клетка. 1993; 75: 13–23. [PubMed] [Google Scholar] 13. Эспиндола Ф.С., Сутер Д.М., Партата Л.Б., Цао Т., Воленски Дж.С., Чейни Р.Э., Кинг С.М., Мусекер М.С. Состав легких цепей миозина-Va головного мозга курицы: кальмодулин, основные легкие цепи миозина-II и легкая цепь динеина 8 кДа / PIN. Цитоскелет клеточного мотиля.2000; 47: 269–281. [PubMed] [Google Scholar] 14. Koide H, Kinoshita T, Tanaka Y, Tanaka S, Nagura N, Meyer zu Horste G, Miyagi A, Ando T. Идентификация единственного специфического мотива IQ миозина V, от которого кальмодулин диссоциирует в присутствии биохимии Ca2 +. 2006. 45: 11598–11604. [PubMed] [Google Scholar] 15. Де Ла Круз Э.М., Уэллс А.Л., Суини Х.Л., Остап Э.М. Зависимость кинетики миозина V. изоформ актина и легкой цепи. Биохимия. 2000; 39: 14196–14202. [PubMed] [Google Scholar] 16. Данн А.Р., Спудич Я.А.Динамика несвязанной головки при процессивной транслокации миозина V. Nat Struct Mol Biol. 2007. 14: 246–248. [PubMed] [Google Scholar] 17. Terrak M, Wu G, Stafford WF, Lu RC, Dominguez R. Две различные структуры легкой цепи миозина индуцируются специфическими вариациями в функциональных последствиях связанных мотивов IQ. Эмбо Дж. 2003; 22: 362–371. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 18. Terrak M, Rebowski G, Lu RC, Grabarek Z, Dominguez R. Структура домена связывания легкой цепи миозина V.Proc Natl Acad Sci U S. A. 2005; 102: 12718–12723. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 19. Уокер М.Л., Берджесс С.А., Селлерс-младший, Ван Ф., Хаммер Д.А., 3-й, Триник Дж., Найт П.Дж. Двуглавое связывание процессивного миозина с F-актином. Природа. 2000; 405: 804–807. [PubMed] [Google Scholar] 20. Ганот А., Нахлиэль Э., Фридман Р., Гутман М. Движение Миозина V: уроки молекулярно-динамических исследований пептидов IQ в рычаге. Биохимия 2007 [PubMed] [Google Scholar] 21. Пеннестри М., Мелино С., Контесса Г.М., Касавола Е.С., Пачи М., Раньини-Уилсон А., Цицеро Д.О.Структурная основа взаимодействия легкой цепи миозина Mlc1p с мотивами миозина V Myo2p IQ. J Biol Chem. 2007. 282: 667–679. [PubMed] [Google Scholar] 22. Watanabe M, Nomura K, Ohyama A, Ishikawa R, Komiya Y, Hosaka K, Yamauchi E, Taniguchi H, Sasakawa N, Kumakura K, Ushiki T, Sato O, Ikebe M, Igarashi M. Myosin-Va регулирует экзоцитоз через субмикромолярный Са2 + -зависимое связывание синтаксина-1А. Mol Biol Cell. 2005; 16: 4519–4530. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 23. Кубонива Х., Тяндра Н., Гжесик С., Рен Х., Клее С.Б., Бакс А.Состав раствора кальмодулина, не содержащего кальция. Nat Struct Biol. 1995; 2: 768–776. [PubMed] [Google Scholar] 24. Чжан М., Танака Т., Икура М. Индуцированный кальцием конформационный переход, выявленный структурой раствора апокальмодулина. Nat Struct Biol. 1995; 2: 758–767. [PubMed] [Google Scholar] 25. Houdusse A, Gaucher JF, Krementsova E, Mui S, Trybus KM, Cohen C. Кристаллическая структура апокальмодулина, связанного с первыми двумя мотивами IQ миозина V, выявляет существенные особенности распознавания. Proc Natl Acad Sci U S A.2006; 103: 19326–19331. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 26. Кременцов Д.Н., Кременцова Е.Б., Трибус К.М. Миозин V: регуляция кальцием, кальмодулином и хвостовым доменом. J Cell Biol. 2004. 164: 877–886. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 27. Лу Х., Кременцова Е.Б., Трибус К.М. Регулирование процессивности миозина V кальцием на уровне одной молекулы. J Biol Chem. 2006; 281: 31987–31994. [PubMed] [Google Scholar] 28. Трибус К.М., Гущин М.И., Луи Х., Хейзелвуд Л., Кременцова Е.Б., Фолькманн Н., Ханейн Д.Влияние кальция на кальмодулин, связанный с мотивами IQ миозина V. J. Biol Chem. 2007. 282: 23316–23325. [PubMed] [Google Scholar] 29. Мур JR, Кременцова Е.Б., Trybus KM, Warshaw DM. Миозин V демонстрирует высокий рабочий цикл и большое унитарное смещение. J Cell Biol. 2001. 155: 625–635. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 30. Перселл TJ, Моррис C, Spudich JA, Суини HL. Роль плеча рычага в процессивном шагании миозина V. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2002; 99: 14159–14164. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 31.Сакамото Т., Илдез А., Селвин ПР, Продавцы мл. Размер шага определяется длиной шейки в миозине V. Биохимия. 2005; 44: 16203–16210. [PubMed] [Google Scholar] 32. Вейгель С., Ван Ф., Барту М.Л., Селлерс Дж. Р., Моллой Дж. Э. Стробируемая походка процессивного молекулярного мотора, миозина V. Nat Cell Biol. 2002; 4: 59–65. [PubMed] [Google Scholar] 33. Schott DH, Collins RN, Bretscher A. Скорость транспорта секреторных пузырьков в живых клетках зависит от длины плеча миозина-V. J Cell Biol. 2002; 156: 35–39. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 34.Wu X, Bowers B, Rao K, Wei Q, Hammer JA., 3-я Визуализация динамики меланосом в меланоцитах дикого типа и в разбавленных меланоцитах предлагает парадигму для функции миозина V In vivo. J Cell Biol. 1998; 143: 1899–1918. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 35. Wu X, Rao K, Bowers MB, Copeland NG, Jenkins NA, Hammer JA., 3rd Rab27a обеспечивает возможность миозин-Va-зависимого захвата меланосомы путем рекрутирования миозина в органеллы. J Cell Sci. 2001; 114: 1091–1100. [PubMed] [Google Scholar] 36. Насименто А.А., Чейни Р.Э., Таухата С.Б., Ларсон Р.Э., Мусекер М.С.Ферментативная характеристика и картирование функциональных доменов миозина-V головного мозга. J Biol Chem. 1996; 271: 17561–17569. [PubMed] [Google Scholar] 37. Сеперак П.К., Мерсер Д.А., Штробель М.С., Коупленд Н.Г., Дженкинс Н.А. Ретровирусные последовательности, расположенные внутри интрона разбавленного гена, изменяют экспрессию разбавленного гена тканеспецифическим образом. Эмбо Дж. 1995; 14: 2326–2332. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 38. Wu XS, Rao K, Zhang H, Wang F, Sellers JR, Matesic LE, Copeland NG, Jenkins NA, Hammer JA., 3-я идентификация рецептора органеллы для миозина-Va.Nat Cell Biol. 2002. 4: 271–278. [PubMed] [Google Scholar] 39. Hodi Z, Nemeth AL, Radnai L, Hetenyi C, Schlett K, Bodor A, Perczel A, Nyitray L. Альтернативно сплайсированный экзон B миозина Va необходим для связывания связанной с хвостом легкой цепи, разделяемой динеином. Биохимия. 2006. 45: 12582–12595. [PubMed] [Google Scholar] 40. Wagner W, Fodor E, Ginsburg A, Hammer JA., 3rd. Связывание DYNLL2 с миозином Va требует альтернативно сплайсированного экзона B и стабилизирует часть домена спиральной спирали миозина.Биохимия. 2006; 45: 11564–11577. [PubMed] [Google Scholar] 41. Puthalakath H, Villunger A, O’Reilly LA, Beaumont JG, Coultas L, Cheney RE, Huang DC, Strasser A. Bmf: проапоптотический белок Bh4, регулируемый взаимодействием с моторным комплексом актина миозина V, активируемым аноикисом. Наука. 2001; 293: 1829–1832. [PubMed] [Google Scholar] 42. Naisbitt S, Valtschanoff J, Allison DW, Sala C, Kim E, Craig AM, Weinberg RJ, Sheng M. Взаимодействие белкового комплекса, связанного с постсинаптической плотностью-95 / доменом гуанилаткиназы, с легкой цепью миозина-V и динеина.J Neurosci. 2000; 20: 4524–4534. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 43. Пашкова Н., Катлетт Н.Л., Новак Дж.Л., Ву Г., Лу Р., Коэн Р.Э., Вейсман Л.С. Присоединение Myosin V к грузу требует тесной ассоциации двух функциональных субдоменов. J Cell Biol. 2005. 168: 359–364. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 44. Катлетт Н.Л., Дуэкс Дж. Э., Тан Ф., Вейсман Л.С. Две различные области в дрожжевом миозин-V-хвостовом домене необходимы для перемещения разных грузов. J Cell Biol. 2000; 150: 513–526. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 45.Пашкова N, Jin Y, Ramaswamy S, Weisman LS. Структурная основа дискриминации миозина V между отдельными грузами. Эмбо Дж. 2006; 25: 693–700. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 46. Хуанг Дж. Д., Коуп М. Дж., Мермолл В., Стробел М. С., Кендрик-Джонс Дж., Рассел Л. Б., Мусекер М. С., Коупленд Н. Г., Дженкинс Н. А.. Молекулярно-генетическое вскрытие мышиного нетрадиционного миозина-VA: мутации в области головы. Генетика. 1998; 148: 1951–1961. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 47. Матесик Л. Е., Ип Р., Ройсс А. Е., Свинг Д. А., О’Салливан Т. Н., Флетчер К. Ф., Коупленд Н. Г., Дженкинс Н. А..Мутации в Mlph, кодирующие члена семейства эффекторов Rab, вызывают дефекты транспорта меланосом, наблюдаемые у свинцовых мышей. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2001; 98: 10238–10243. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 48. Уилсон С.М., Ип Р., Свинг Д.А., О’Салливан Т.Н., Чжан Й., Новак Е.К., Суонк Р.Т., Рассел Л.Б., Коупленд Н.Г., Дженкинс Н.А. Мутация Rab27a вызывает дефекты транспорта везикул, наблюдаемые у пепельных мышей. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2000; 97: 7933–7938. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 49.Фукуда М., Курода Т.С., Микошиба К. Slac2-a / меланофилин, недостающее звено между Rab27 и миозином Va: последствия трехчастного белкового комплекса для транспорта меланосом. J Biol Chem. 2002; 277: 12432–12436. [PubMed] [Google Scholar] 50. Стром М., Хьюм А.Н., Тарафдер А.К., Баркаджанни Э., Сибра М.С. Семейство Rab27-связывающих белков. Меланофилин связывает Rab27a и функцию миозина Va в транспорте меланосом. J Biol Chem. 2002; 277: 25423–25430. [PubMed] [Google Scholar] 51. Geething NC, Spudich JA. Идентификация минимального сайта связывания миозина Va внутри неструктурированного домена меланофилина.J Biol Chem. 2007. 282: 21518–21528. [PubMed] [Google Scholar] 52. Ву X, Сакамото Т., Чжан Ф., Селлерс Дж. Р., Хаммер Дж. А., 3-е восстановление транспортного комплекса, содержащего Rab27a, меланофилин и миозин, in vitro. FEBS Lett. 2006; 580: 5863–5868. [PubMed] [Google Scholar] 53. Хейлз К.М., Верман Дж. П., Голденринг-младший. Взаимодействующий белок 2 семейства Rab11 связывается с Myosin Vb и регулирует рециклинг плазматической мембраны. J Biol Chem. 2002; 277: 50415–50421. [PubMed] [Google Scholar] 54. Лапьер Л.А., Кумар Р., Хейлз С.М., Наварра Дж., Бхартур С.Г., Бернетт Дж. О., Прованс Д.В., мл., Мерсер Дж. А., Бахлер М., Голденринг-младший.Myosin vb связан с системами рециркуляции плазматической мембраны. Mol Biol Cell. 2001; 12: 1843–1857. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 55. Роланд Дж. Т., Кенуорти А. К., Перанен Дж., Каплан С., Голденринг-младший. Миозин Vb взаимодействует с Rab8a по трубчатой ​​сети, содержащей EHD1 и EHD3. Mol Biol Cell. 2007. 18: 2828–2837. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 56. Гонсальвез ГБ, Урбинати ЧР, Лонг РМ. Локализация РНК в дрожжах: движение к механизму. Biol Cell. 2005. 97: 75–86. [PubMed] [Google Scholar] 57.Тан Ф., Кауфман Э. Дж., Новак Дж. Л., Нау Дж. Дж., Катлетт Н. Л., Вейсман Л. С.. Регулируемая деградация рецептора миозина класса V направляет движение дрожжевой вакуоли. Природа. 2003; 422: 87–92. [PubMed] [Google Scholar] 58. Li JF, Nebenfuhr A. Нацеливание миозина XI на органеллы опосредуется двумя субдоменами глобулярного хвоста с отдельными сайтами связывания грузов. J Biol Chem. 2007; 282: 20593–20602. [PubMed] [Google Scholar] 59. Karcher RL, Roland JT, Zappacosta F, Huddleston MJ, Annan RS, Carr SA, Гельфанд VI. Регуляция клеточного цикла миозина-V кальций / кальмодулин-зависимой протеинкиназой II.Наука. 2001; 293: 1317–1320. [PubMed] [Google Scholar] 60. Fukuda M, Itoh T. Slac2-a / melanophilin содержит множество PEST-подобных последовательностей, которые очень чувствительны к протеолизу. J Biol Chem. 2004; 279: 22314–22321. [PubMed] [Google Scholar] 61. Mehta AD, Rock RS, Rief M, Spudich JA, Mooseker MS, Cheney RE. Миозин-V — это процессивный мотор на основе актина. Природа. 1999; 400: 590–593. [PubMed] [Google Scholar] 62. Селлерс Дж. Р., Вейгель С. Ходьба с миозином В. Curr Opin Cell Biol. 2006; 18: 68–73. [PubMed] [Google Scholar] 63.Де Ла Круз Е.М., Уэллс А.Л., Розенфельд С.С., Остап Е.М., Суини Х.Л. Кинетический механизм миозина V. Proc Natl Acad Sci U S. A. 1999; 96: 13726–13731. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 64. Бейкер Дж. Э., Кременцова Е.Б., Кеннеди Г. Г., Армстронг А., Трибус К. М., Уоршоу Д. М.. Процессивность миозина V: множественные кинетические пути для координации головы к голове. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2004; 101: 5542–5546. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 65. Уэмура С., Хигучи Х., Оливарес А.О., Де Ла Круз Е.М., Ишивата С. Механохимическое соединение двух подэтапов в одном двигателе миозина V.Nat Struct Mol Biol. 2004; 11: 877–883. [PubMed] [Google Scholar] 66. Йенго К.М., Де ла Круз Е.М., Сейфер Д., Остап Е.М., Суини Х.Л. Кинетическая характеристика состояний слабого связывания миозина V. Биохимия. 2002; 41: 8508–8517. [PubMed] [Google Scholar] 67. Йенго К.М., Суини Х.Л. Функциональная роль петли 2 в миозине V. Биохимия. 2004. 43: 2605–2612. [PubMed] [Google Scholar] 68. Кременцова Е.Б., Ходжес А.Р., Лу Х., Трибус К.М. Процессивность химерных миозинов класса v. J Biol Chem. 2006; 281: 6079–6086. [PubMed] [Google Scholar] 69.Розенфельд СС, Суини Х.Л. Модель процессивности миозина V. J Biol Chem. 2004; 279: 40100–40111. [PubMed] [Google Scholar] 70. Перселл TJ, Суини HL, Spudich JA. Силозависимое состояние контролирует координацию процессивного миозина V. Proc Natl Acad Sci U S. 2005; 102: 13873–13878. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 71. Вейгель С., Шмитц С., Ван Ф., Селлерс-младший. Зависимая от нагрузки кинетика миозина-V может объяснить его высокую процессивность. Nat Cell Biol. 2005; 7: 861–869. [PubMed] [Google Scholar] 72.Forgacs E, Cartwright S, Sakamoto T, Sellers JR, Corrie JET, Webb MR, White HD. Кинетика диссоциации АДФ от следовой и ведущей головок актомиозина V после силового удара. Журнал биологии химии 2007 [PubMed] [Google Scholar] 73. Йылдыз А., Форки Дж. Н., МакКинни С.А., Ха Т, Голдман Ю.Е., Селвин П.Р. Миозин V передается из рук в руки: визуализация с помощью одного флуорофора с локализацией 1,5 нм. Наука. 2003; 300: 2061–2065. [PubMed] [Google Scholar] 74. Уоршоу Д.М., Кеннеди Г.Г., Ворк С.С., Кременцова Е.Б., Бек С., Трибус К.М.Дифференциальная маркировка головок миозина V с помощью квантовых точек позволяет напрямую визуализировать процессивность передачи вручную. Biophys J. 2005; 88: L30–32. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 75. Широгучи К., Киносита К., Миосин-младший ходит с помощью рычага и броуновского движения. Наука. 2007; 316: 1208–1212. [PubMed] [Google Scholar] 76. Komori Y, Iwane AH, Yanagida T. Миозин-V совершает два броуновских поворота на 90 градусов с шагом 36 нм. Nat Struct Mol Biol. 2007; 14: 968–973. [PubMed] [Google Scholar] 77. Леви В, Гельфанд В.И., Серпинская А.С., Граттон Э.Меланосомы, транспортируемые миозином-V в меланофорах Xenopus, совершают медленные шаги длиной 35 нм. Биофиз Дж. 2006; 90: L07–09. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 78. Курал Ц., Серпинская А.С., Чжоу Ю.Х., Гольдман Р.Д., Гельфанд В.И., Сельвин П.Р. Отслеживание меланосом внутри клетки для изучения молекулярных моторов и их взаимодействия. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2007; 104: 5378–5382. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 79. Li XD, Mabuchi K, Ikebe R, Ikebe M. Са2 + -индуцированная активация АТФазной активности миозина Va сопровождается большим конформационным изменением.Biochem Biophys Res Commun. 2004. 315: 538–545. [PubMed] [Google Scholar] 80. Ван Ф., Тирумуруган К., Стаффорд У. Ф., Хаммер Дж. А., 3-й, Рыцарь П. Джей, Селлерс-младший. Регулируемая конформация миозина V. J Biol Chem. 2004. 279: 2333–2336. [PubMed] [Google Scholar] 81. Trybus KM, Huiatt TW, Lowey S. Изогнутая мономерная конформация миозина из гладких мышц. Proc Natl Acad Sci U S. A. 1982; 79: 6151–6155. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 82. Трибус К.М., Лоуи С. Конформационные состояния гладкомышечного миозина. Влияние фосфорилирования легкой цепи и ионной силы.J Biol Chem. 1984; 259: 8564–8571. [PubMed] [Google Scholar] 83. Хакни Д.Д., Левитт Д.Д., Сухан Дж. Кинезин претерпевает конформационный переход от 9S к 6S. J Biol Chem. 1992; 267: 8696–8701. [PubMed] [Google Scholar] 84. Лю Дж., Тейлор Д.В., Кременцова Е.Б., Трибус К.М., Тейлор К.А. Трехмерная структура миозина V в ингибированном состоянии по данным криоэлектронной томографии. Природа. 2006; 442: 208–211. [PubMed] [Google Scholar] 85. Li XD, Jung HS, Mabuchi K, Craig R, Ikebe M. Глобулярный хвостовой домен миозина Va функционирует как ингибитор мотора миозина Va.J Biol Chem. 2006; 281: 21789–21798. [PubMed] [Google Scholar] 86. Тирумуруган К., Сакамото Т., Хаммер Дж. А., 3-е место, Селлерс Дж. Р., Рыцарь П. Джей. Груз-связывающий домен регулирует структуру и активность миозина 5. Природа. 2006; 442: 212–215. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 87. Ли XD, Икебе Р., Икебе М. Активация функции миозина Va меланофилином, специфическим стыковочным партнером миозина VA. J Biol Chem. 2005; 280: 17815–17822. [PubMed] [Google Scholar] 88. Гросс С.П., Тума М.Ц., Диакон С.В., Серпинская А.С., Рейлейн А.Р., Гельфанд В.И.Взаимодействие и регуляция молекулярных моторов у меланофоров Xenopus. J Cell Biol. 2002; 156: 855–865. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 89. Али М.Ю., Кременцова Е.Б., Кеннеди Г.Г., Махаффи Р., Поллард Т.Д., Трибус К.М., Уоршоу Д.М. Myosin Va маневрирует через пересечения актина и диффундирует по микротрубочкам. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2007; 104: 4332–4336. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 90. Снайдер Дж., Лин Ф., Захеди Н., Родионов В., Ю. С. С., Гросс С.П. Внутриклеточный транспорт на основе актина: насколько далеко вы продвинетесь, зависит от того, как часто вы переключаетесь.Proc Natl Acad Sci U S. A. 2004; 101: 13204–13209. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 91. Брутто SP. Молекулярные моторы: сказка о двух нитях. Curr Biol. 2007; 17: R277–280. [PubMed] [Google Scholar] 93. Тейлор К.А. Регуляция и рециклинг миозина V. Curr Opin Cell Biol. 2007; 19: 67–74. [PubMed] [Google Scholar]

Что такое главный термин?

Заголовок , также известный как ключевое слово заголовка, является популярным ключевым словом, которое приводит к большим объемам поиска. Ключевые слова очень конкурентоспособны, когда дело доходит до ранжирования, и они противоположны ключевым словам с длинным хвостом.

Эти забавные названия возникли из-за внешнего вида дистрибутива, который вы видите ниже. Ключевые слова сконцентрированы на вершине — они вызывают большие объемы поиска и большую конкуренцию. Ключевые слова с длинным хвостом разбросаны по всему (как вы уже догадались) длинному хвосту. Эти ключевые слова генерируют относительно небольшие объемы поиска, и они не очень конкурентоспособны.

Зачем мне нужны главные термины?

Когда вы сначала думаете об этом, может показаться, что сосредоточение внимания на основных терминах — отличная тактика поискового маркетинга.В конце концов, они обеспечивают наибольшие объемы поиска — почему бы вашему бизнесу не попытаться рекламировать как можно больше людей одновременно?

Да, привлечь внимание к вашему бренду или продукту — это привлекательная идея. Но есть два ключевых фактора, которые вы должны учитывать при разработке своей стратегии ключевых слов: конкуренция и поисковое намерение.

Мы уже вкратце коснулись конкуренции. Проще говоря, невероятно сложно получить первое место — платное или органическое — при назначении ставок или таргетинге на заголовок.Слишком много конкурентов делают более высокие ставки, имеют более высокие показатели качества и повышают авторитет домена. Ваши цели в области PPC и SEO должны быть амбициозными и реалистичными. В противном случае вы погрузитесь в поиски.

Цель поиска — это причина, по которой кто-то вводит запрос в поисковую систему. Полезно рассмотреть три типа поисковых запросов. Информационные поисковые запросы, такие как «фильм», исходят от людей, которые хотят узнать что-то по определенной теме. Навигационные поисковые запросы, такие как «Facebook», предназначены для посещения определенного веб-сайта или веб-страницы.Транзакционные поисковые запросы, такие как «кофеварка рядом со мной», демонстрируют коммерческие намерения: они исходят от людей, желающих совершить покупки.

Рекламодатели не должны поддаваться искушению сосредоточиться на ключевых словах, вызывающих большой объем запросов, потому что эти запросы часто не имеют коммерческого намерения. Например, поиск по запросу «программное обеспечение» вряд ли завершится транзакцией — поисковик либо надеется узнать, либо очень рано в процессе покупки. С другой стороны, поиск с длинным хвостом, такой как «Учетная запись Google Рекламы программного обеспечения PPC», демонстрирует гораздо большую готовность к покупке.Поэтому в интересах вашего ограниченного маркетингового бюджета рекомендуется назначать ставки и настраивать таргетинг на последний.

Какие есть стратегии использования ключевых слов?

В мире маркетинга в поисковых системах, и, в частности, контекстной рекламы, большое значение имеют два слова: релевантная аудитория. Чтобы понять, почему, давайте подумаем о некоторых вещах, которые могут произойти, когда вы показываете свою рекламу нерелевантной аудитории.

Люди, которых не интересуют ваши товары или услуги, нажимают на ваши объявления.Это стоит вам, сколько бы ни была ваша цена за клик (CPC), которая, в зависимости от вашей отрасли, может быть непомерно высокой, и абсолютно ничего не предлагает взамен. Реклама для нерелевантной аудитории сродни сжиганию денег. Сжигание денег нехорошо для бизнеса.

Люди игнорируют вашу рекламу, потому что они не интересуются вашим продуктом или услугой. Вы можете подумать: «Хорошо, они не совершили конверсию, но они также не нажимали на мое объявление и не стоили мне денег. Это не так уж и плохо, правда? » Неправильный! Это увеличит ваш рейтинг кликов (CTR) — показатель, который играет огромную роль в вашем показателе качества.По мере того, как ваш CTR падает, Google считает, что ваше объявление становится все менее релевантным, тем самым давая поисковой системе команду наказать вас на аукционе рекламы. Чем менее актуальна аудитория, тем ниже ваш CTR и хуже ваша производительность!

Мы обещаем, что все это ведет к важному моменту: вам необходимо провести исследование ключевых слов, если вы хотите выжить в поисковом маркетинге. Конечная цель вашего исследования — найти золотую середину ключевых слов, наиболее релевантных вашему бизнесу, но при этом не быть настолько конкурентоспособными, чтобы у вас не было ни единого шанса.К счастью, есть множество инструментов и сервисов, которые помогут вам в вашем исследовании.

Стоит ли инвестировать в «длинный хвост»?

♦ БЛОГ: прочтите ответ Криса Андерсона, автора книги The Long Tail , и примите участие в этом онлайн-обсуждении.

♦ БЛОГ: прочтите ответ Аниты Элберс Крису Андерсону и примите участие в этом онлайн-обсуждении.

Обычно за год Grand Central Publishing (ранее Warner Books) выходит на рынок с 275–300 названиями книг, разбросанных по двум каталогам — осеннему и зимнему спискам.Для каждого списка компания выделяет несколько книг, которые, по ее мнению, имеют наибольший потенциал продаж, и дает им все преимущества своих маркетинговых возможностей. Из них в нем освещены всего две книги, одна художественная и одна научно-популярная, в отношении которых издатель компании, по ее словам, готов «сделать все возможное». Осенью 2007 года этими книгами были Stone Cold Дэвида Балдаччи и I Am America (and So Can You!) Стивена Колберта . Эффект от этой стратегии проявляется в показателях продаж и прибылях.В то время как 61 издание в твердом переплете, которое Grand Central включило в свой первый список на 2006 год, в среднем понесло расходы в размере 650 000 долларов и принесло валовую прибыль чуть менее 100 000 долларов, на эти средние показатели повлиял широкий диапазон цифр. Самая продаваемая игра Grand Central потребовала 7 миллионов долларов, а чистая выручка от продаж составила чуть менее 12 миллионов долларов, а валовая прибыль составила почти 5 миллионов долларов, что в 50 раз больше среднего.

Grand Central реализует так называемую стратегию блокбастеров — проверенный временем подход, особенно в сфере СМИ и развлечений.В условиях ограниченного пространства на полках магазинов и в традиционных каналах сбыта, а также при стремлении розничных продавцов и дистрибьюторов к максимальному увеличению своей прибыли производители, как правило, сосредотачивают свои маркетинговые ресурсы на небольшом количестве вероятных бестселлеров. Хотя такой подход сопряжен со значительным риском, они ожидают, что огромная отдача от случайных ударов покроет убытки от многих промахов и что несколько крупных продавцов принесут львиную долю доходов и прибыли. В 2006 году только 20% изданий Grand Central составили примерно 80% продаж и даже большую долю прибыли.

Однако за десятилетия, прошедшие с тех пор, как стратегия блокбастеров впервые появилась, в коммерции многое изменилось. Сегодня мы живем в мире повсеместных информационных и коммуникационных технологий, где розничные торговцы имеют практически бесконечное пространство на полках, а потребители могут искать среди бесчисленных вариантов. Когда книги, фильмы и музыка оцифровываются и, следовательно, дешево копировать, возникает вопрос: эффективна ли стратегия блокбастеров?

Одна школа мысли утверждает, что да. Хорошо представленные экономистами Робертом Фрэнком и Филипом Куком в их книге 1995 года The Winner-Take-All Society , эта школа утверждает, что широкая, быстрая коммуникация и легкое воспроизведение создают динамику, в результате которой популярные продукты становятся непропорционально прибыльными для поставщиков, а клиенты — еще более вероятно, что их вкусы и покупательские привычки совпадают.Авторы предлагают три причины для своего взгляда: Во-первых, меньший талант — плохая замена большему таланту. Почему, например, люди будут слушать вторую лучшую в мире запись Carmen , когда лучшая из них доступна? Таким образом, даже небольшое преимущество перед конкурентами может быть вознаграждено лавиной рыночной доли. Во-вторых, люди по своей природе социальны и поэтому ценят то, что слушают ту же музыку и смотрят те же фильмы, что и другие. В-третьих, когда предельные затраты на воспроизведение и распространение продуктов невелики — как это, безусловно, бывает с товарами, которые могут быть оцифрованы — ценовое преимущество активного продавца огромно.Фрэнк и Кук развивали более раннюю работу экономиста Шервина Розена, описывающую эффект «суперзвезд», при котором несколько лучших специалистов в данной области все дальше отдаляются от стаи. Согласно такому образу мыслей, хиты будут продолжаться — во все большем ущербе также и ранним.

Хотя этот тезис продолжает оставаться в силе, в последние годы возникла другая идея, представленная столь же убедительно и предлагающая обратное. Теория «длинного хвоста» оформилась в статье Криса Андерсона, редактора журнала Wired , которая в 2006 году превратилась в книгу «« Длинный хвост »: почему будущее бизнеса — продавать меньше или больше ».Подзаголовок книги кратко описывает стратегические последствия. Андерсон считает, что теперь, когда потребители могут найти и позволить себе продукты, более точно соответствующие их индивидуальным вкусам, они откажутся от однородных хитов. Следовательно, мудрая компания перестанет полагаться на блокбастеры и сосредоточится на прибылях, которые можно получить от «длинного хвоста» — нишевых предложений, которые невозможно обеспечить с прибылью через обычные каналы. (См. Врезку «Коротко о теории длинного хвоста».)

Какое явление действительно имеет место на сегодняшних рынках? Чтобы выяснить это, я исследовал модели продаж в музыкальной индустрии и индустрии домашнего видео — двух рынках, которые Андерсон и другие часто приводят в качестве примеров теории «длинного хвоста» в действии.В частности, я изучил данные о продажах, полученные от Nielsen VideoScan и Nielsen SoundScan, которые отслеживают еженедельные покупки видео и музыки через интернет-магазины и офлайн-магазины; от Quickflix, австралийской службы проката DVD по почте; и от Rhapsody, музыкального онлайн-сервиса, который позволяет подписчикам выбирать песни из большой базы данных за фиксированную ежемесячную плату (которую Андерсон часто цитирует в The Long Tail ).

То, что я обнаружил, может представлять интеллектуальный интерес для читателей, которые могут связать обе теории со своим собственным опытом потребления и оценить напряженность между ними.Но для менеджеров, чья работа заключается в навигации по цифровому ландшафту, интерес будет гораздо больше, чем академический. Если вы производитель, вам необходимо принять неотложные решения в отношении разработки продукта и инвестиций в маркетинг. Если вы розничный торговец, вы должны решить, насколько широкий ассортимент будет в наличии, и следует ли направлять клиентов к непонятному выбору, который может принести более высокую прибыль. В любом случае ваш выбор будет сильно отличаться в зависимости от того, под какой теорией вы согласны. Вы не сделаете правильных звонков, если не поймете, как онлайн-каналы на самом деле меняют рынки.

Форма потребления

Когда выбор обширен, а поиск удобен, как складываются объемы продаж? Они наклоняются к началу кривой распределения или к хвосту? Сведения о транзакциях Rhapsody — хорошее место. На первой диаграмме ниже показаны совокупные выборы более чем 60 000 подписчиков, у которых на выбор было более 1 миллиона треков. За трехмесячный период 2006 года, изображенный здесь, эти клиенты совершили более 32 миллионов транзакций или «игр».«А что мы видим? Понятно, что высокая концентрация. Данные, лежащие в основе графика, показывают, что на первые 10% наименований приходится 78% всех воспроизведений, а на 1% лучших наименований приходится 32% всех воспроизведений. Однако сделайте паузу, чтобы поразмыслить над этими числами. Один процент от миллиона по-прежнему составляет 10 000 — намного больше, чем количество названий, которые большинство американских радиостанций играет в конкретный год, а в переводе на альбомные термины равняется всему музыкальному инвентарю типичного магазина Wal-Mart.

Снимок нишевых продуктов

На втором графике показано распределение продаж компании Quickflix за шесть месяцев 2006 года, которая предлагает чуть менее 16 000 наименований.Здесь на 10% лучших DVD приходилось 48% всех прокатов, а на 1% лучших — 18% всех прокатов. Другими словами, около 150 наименований (примерно количество фильмов, ежегодно выпускаемых в кинотеатры крупными голливудскими студиями) составили почти пятую часть всех прокатов. Концентрация не такая сильная, как в Rhapsody, но все же существенная.

Графики дают представление о стоимости нишевых продуктов. Однако стратегам необходимо понимать, как меняется картина. По мере того как спрос смещается от офлайн-ритейлеров с ограниченным полочным пространством к онлайн-каналам с гораздо большим ассортиментом, становится ли хвост распределения продаж длиннее и толще?

Мы с моим коллегой Феликсом Оберхольцер-Джи изучали этот вопрос.В частности, мы изучили еженедельные продажи домашних видео по данным Nielsen VideoScan с января 2000 г. по август 2005 г., сосредоточив внимание на случайной выборке из почти 5 500 наименований. Используя эконометрические модели, которые контролируют ряд возможных сопутствующих тенденций, мы обнаружили, что объем продаж действительно заметно сдвинулся в хвост: количество наименований, проданных всего несколькими копиями, почти удвоилось за любую неделю с 2000 по 2005 год. однако количество наименований, вообще не проданных за неделю, увеличилось в четыре раза.Таким образом, хвост представляет собой быстро увеличивающееся количество наименований, которые продаются очень редко или никогда. Вместо того, чтобы набухать, хвост становится намного длиннее и более плоским. Более того, мы определили, что это не просто результат резкого увеличения количества наименований, появившихся на рынке в последние годы, или перехода с VHS на DVD; это правда о длинном хвосте.

Хвост вместо того, чтобы набухать, становится намного длиннее и более плоским. Это правда о длинном хвосте.

Между тем, наше исследование также показало, что успех сосредоточен на все меньшем количестве бестселлеров во главе кривой распространения. С 2000 по 2005 год количество наименований в первых 10% еженедельных продаж упало более чем на 50% — рост концентрации, характерный для рынков, где победитель получает все. Важность отдельных бестселлеров не уменьшается со временем. Он растет.

Подобные тенденции очевидны в музыкальной индустрии. Здесь я провел исследование продаж музыки в физическом и цифровом формате с января 2005 года по апрель 2007 года для случайной выборки из 3300 исполнителей, включая поп-сенсаций Джастина Тимберлейка и Maroon 5, а также гораздо менее известного джазового саксофониста Кирка Валума и инди-рок-группу. Уважаемые.Данные, собранные Nielsen SoundScan, показывают период быстрых изменений, когда количество проданных цифровых устройств увеличилось с одной трети до почти двух третей. Мое исследование показывает сдвиг в сторону хвоста распределения продаж, и неудивительно, что это изменение более выражено для цифровых треков и альбомов, чем для физических. Однако, как видно из диаграммы ниже, концентрация продаж цифровых треков значительно выше, чем продаж физических альбомов; По мере того как доля цифровых единиц растет месяц за месяцем, растет и степень концентрации продаж.Хвост снова удлиняется, но сглаживается, и хотя сегодняшние хиты, возможно, больше не достигают объемов продаж, типичных для допиратской эпохи, все меньшее количество топовых наименований продолжает составлять значительную часть общего спроса на музыку.

Продажа музыкальных записей

Когда я различаю исполнителей на небольших независимых лейблах и исполнителей на крупных лейблах, я обнаруживаю, что первые получают некоторую долю рынка в конце кривой в результате перехода к цифровым рынкам.Однако это преимущество быстро исчезает по мере того, как мы движемся вверх по кривой: более существенная тенденция заключается в том, что независимые артисты фактически потеряли долю среди наиболее популярных изданий в пользу артистов-суперзвезд на крупных лейблах. (Эти результаты верны, когда я контролирую количество и тип названий, которые артисты выводят на рынок.) Таким образом, цифровые каналы могут еще больше укрепить позиции избранной группы победителей.

Вкус к неизвестности?

Когда мы смотрим на данные о транзакциях клиентов, отмеченные выше тенденции приобретают большее значение.Маркетологам жизненно важно понимать, кто несет ответственность за растущий объем бизнеса, который мы видим в хвосте. Неужели небольшая группа фанатиков стимулирует спрос на малоизвестные продукты? Если это так, маловероятно, что произойдет действительно значительный сдвиг в медиапотреблении. Или большое количество потребителей регулярно отваживаются на «длинный хвост»? Если это так, важно оценить степень их аппетита к этим продуктам и степень их удовлетворенности ими.

Шаблоны, выявленные в моем исследовании, предполагают, что мы не скоро выйдем из того, что Андерсон называет «эрой водяных кулеров».Эти закономерности далеко не новы: они были описаны Уильямом Макфи в начале 1960-х годов в Формальных теориях массового поведения . «Теория воздействия» Макфи (см. Врезку «Потребители в голове и хвосте») предлагает два важных эмпирических обобщения: во-первых, непропорционально большая доля аудитории популярных товаров состоит из относительно легких потребителей, тогда как непропорционально большая доля аудитории аудитория малоизвестных продуктов состоит из относительно тяжелых потребителей; во-вторых, потребители малоизвестных товаров обычно ценят их меньше, чем популярные.Макфи исследовал свои теории в условиях, которые обычно предлагали менее дюжины альтернатив. Но мое исследование показывает, что его выводы также верны для огромного ассортимента, найденного в Интернете, даже когда сложные системы рекомендаций стремятся стимулировать спрос на продукты с длинным хвостом.

Неужели большая часть бизнеса в «длинном хвосте» создается кучкой иконоборцев, полных решимости маршировать к разным барабанщикам? Ответ однозначный: нет. Мои результаты показывают, что большое количество клиентов время от времени выбирают малоизвестные предложения, которые, учитывая их рейтинг потребления и средний размер ассортимента офлайн-розничных продавцов, вероятно, недоступны в обычных магазинах.Между тем, хиты покупают и потребители самого малоизвестного контента. Хотя они выбирают продукты с разной популярностью, топ-названия обычно составляют большую часть их выбора. (Широкая привлекательность этих топ-игр, конечно, в первую очередь делает их популярными.)

Неужели большая часть бизнеса в «длинном хвосте» создается кучкой иконоборцев, настроенных идти к разным барабанщикам? №

На выставке «Тележки покупателей видео Quickflix» этот вывод представлен более подробно.Сначала посмотрите на крайнюю правую полоску. Это разбивка выборов, сделанных большой группой клиентов Quickflix, каждый из которых арендовал хотя бы один из самых популярных (верхних децилей) DVD-дисков компании в течение шестимесячного периода. В среднем 61% арендных плат этих клиентов приходятся на самый высокий дециль, а еще 13% — на второй по величине. Менее 1% их выбора поступило из низшего дециля — самых неясных названий.

Теперь посмотрите на крайнюю левую панель, которая представляет гораздо меньшую группу клиентов, которые арендовали хотя бы одно из самых малоизвестных названий.В среднем 8% арендной платы этой группы приходилось на этот дециль. Но все же самая большая доля — более трети — пришлась на верхний дециль.

Еще один вывод, сделанный на основе данных о транзакциях, заключается в том, что клиенты, которые берут напрокат малоизвестные фильмы, как правило, являются самыми активными пользователями услуги. В среднем клиенты, выбравшие популярное название, арендовали 20 видеороликов за рассматриваемый шестимесячный период. Однако клиенты, которые попробовали самые малоизвестные предложения, арендовали в среднем 50 человек. Подразумевается, что не существует сегмента с особым вкусом к темному; скорее, клиенты с большими возможностями для содержания рискуют пойти в хвост.Между тем, также в соответствии с теорией Макфи, потребители легкой продукции в основном концентрируются на хитовых товарах.

Мое исследование также отвечает на вопрос: сколько удовольствия приносит малоизвестная продукция по сравнению с продукцией-блокбастером? Мы все легко можем представить себе крайнее удовольствие, которое приносит обнаружение редкого драгоценного камня, идеально подходящего для наших и наших интересов, чтобы дарить их друзьям-единомышленникам. Это, пожалуй, самый романтизированный аспект мышления с длинным хвостом. Многие из нас пережили именно такие моменты; именно они придают заявлениям Криса Андерсона такой резонанс.Проблема в том, что на каждого промышленного дизайнера, который блаженно натыкается на фильмы Чарльза и Рэя Имз, огромное количество семей подвергаются подобным Шерлоку: Собака под прикрытием . Рейтинги, опубликованные клиентами Quickflix, показывают, что малоизвестные заголовки в среднем ценятся меньше, чем популярные.

Скептически настроенные читатели могут сказать, что этого следовало ожидать; более тяжелые потребители, увидев все это, будут более критичными по всем направлениям. Это правда, что эти потребители дают непропорционально низкие оценки малоизвестным товарам, но они также дают непропорционально высокие оценки хитам; у них несколько больший диапазон оценок, чем у более легких потребителей.Возможно, они являются знатоками категории и лучше умеют отличать продукты высшего качества от контента среднего качества. Потребление длиннохвостых предложений более распространено среди людей, которые склонны придерживаться какого-либо жанра — например, классического рок-н-ролла или романтических комедий. Их большее знакомство с альтернативами может поднять рейтинг лучших популярных товаров и понизить — менее известных. Можно предположить и другие объяснения, но факт остается фактом: как бы я ни разрезал клиентскую базу, клиенты дают более низкие оценки непонятным названиям.Вырисовывается сбалансированная картина влияния онлайн-каналов на рыночный спрос: популярные продукты остаются доминирующими даже среди потребителей, которые рискуют глубоко залезть в хвост. Хитовые продукты нравятся больше, чем малоизвестные. Это миф, что малоизвестные книги, фильмы и песни ценятся. То, что потребители покупают в интернет-каналах, во многом совпадает с тем, что они покупали всегда.

Последствия для стратегии

Вскоре после публикации «Длинный хвост » BusinessWeek заявил, что теория Криса Андерсона была самой большой идеей года.Книга получила широкое распространение, и ее название вошло в обиход менеджеров. Андерсон рассказал многочисленным руководителям о его последствиях. Все это повлияло на практику: теория «длинного хвоста» все больше влияет на разработку и оценку бизнес-моделей, особенно в сфере СМИ и развлечений.

Нельзя отрицать, что онлайн-торговля значительно расширила доступ клиентов к товарам всех видов, включая самые малоизвестные. Однако мои выводы показывают, что для компаний было бы неосмотрительно менять традиционную практику и сосредотачиваться на спросе на малоизвестные продукты.Данные показывают, насколько сложно получить прибыль с хвоста. Каковы же тогда последствия моих исследований для практики? У меня есть четыре рекомендации для производителей медиа и развлекательных товаров и четыре для интернет-магазинов или агрегаторов контента, стремящихся получить прибыль от долгосрочного спроса. Хотя мое исследование было сосредоточено на медиаконтенте и информационных товарах, эти рекомендации, вероятно, применимы и к физическим товарам. Фактически, их выгода для производителей и розничных продавцов физических товаров может быть больше из-за более высоких производственных затрат.

Рекомендации производителям

1. Не меняйте радикально стратегии распределения ресурсов блокбастеров или управления портфелем продуктов. Некоторым победителям предстоит пройти долгий путь — возможно, даже дальше, чем раньше.

Мои исследования показывают, что хвост длинный и плоский, и поэтому контент-провайдерам будет сложно извлечь из него большую прибыль. Еще неизвестно, действительно ли среда новых медиа сделает прибыльными многие ранее убыточные нишевые продукты.Онлайн-каналы снижают барьеры для выхода на рынок таких продуктов и, таким образом, создают возможность дополнительных продаж, но они также приводят к потоку продуктов, конкурирующих за внимание потребителей. В своей последней переписке с менеджерами Nielsen SoundScan я узнал, что из 3,9 миллиона цифровых треков, проданных в 2007 году (подавляющее большинство по цене 99 центов каждая через Apple iTunes), поразительные 24% продали только одну копию, а 91% — 3,6. миллиона треков — продано менее 100 копий. Хотя повышенная концентрация продаж может затруднить превращение акцента на блокбастерах в выигрышную стратегию, эффективной альтернативной стратегии пока нет.

2. При производстве нишевых товаров для конечной части дистрибуции сохраняйте расходы на минимально возможном уровне. Ваши шансы на успех здесь тоже невелики, и они, вероятно, станут меньше.

Чрезвычайно низкий спрос на большое количество продуктов в хвостовой части означает, что просто возместить затраты на их производство будет сложно. Учитывая, что малоизвестные продукты, как правило, ценятся меньше, чем хиты, будет очень трудно получить за них какую-либо надбавку.

3. Пытаясь усилить свое присутствие в цифровых каналах, сосредоточьтесь на продвижении своих самых популярных продуктов.

По определению, они охватывают наибольшее количество клиентов, и их больше ценят те, кто их потребляет. Это понимание, возможно, особенно актуально для поставщиков контента, конкурирующих на рынках, поддерживаемых рекламой. Рекламодателям, надеющимся охватить широкий круг потребителей в мире быстро растущих СМИ, лучше размещать рекламу вокруг популярных продуктов; не только их сообщения будут видны чаще, но, поскольку эти продукты обычно нравятся больше, они будут рассматриваться в благоприятном контексте.Поэтому популярные товары могут иметь непропорционально высокую стоимость. Поэтому неудивительно, что крупные медиа-компании все чаще настаивают на большем контроле над решениями о ценообразовании и комплектации наиболее популярных предложений. Недавняя ссора NBC с iTunes — один из примеров.

4. Используйте свои масштабы, чтобы улучшить онлайн-присутствие и спрос на продукты во всем портфеле продуктов. Опять же, ключевую роль здесь играют популярные товары.

Длинный хвост состоит из смеси настоящих нишевых продуктов (которые, по определению Андерсона, не соответствуют планке для традиционного распространения) и старых хитов, являющихся результатом стратегий, ориентированных на блокбастеры.Такие продукты теперь могут жить вечно в сети, даже если их давно убрали с обычных полок; таким образом, старые хиты могут предоставить реальную возможность. У более крупных продюсеров есть преимущество в том, что они могут использовать новые выпуски для стимулирования спроса на старые — например, предыдущие фильмы, в которых снимался актерский состав, или более ранние записи подающего надежды артиста. Компании могут извлечь выгоду из поиска способов регулярно продвигать товары в своих старых каталогах и сочетать старые с новыми продуктами.Опять же, здесь есть предостережение: выгоды могут не перевешивать затраты. Музыкальные компании, например, часто отказываются публиковать старый контент в Интернете, потому что получение прав слишком обременительно. Точно так же, хотя партнерские отношения с каналами часто не позволяют компаниям использовать свой масштаб (например, iTunes от Apple часто дает относительно больше рекламного пространства артистам из независимых звукозаписывающих лейблов, чем, например, артистам из крупных компаний), компании могут использовать свои популярные продукты, чтобы договориться о лучших условиях с каналом. партнеры.Таким образом, более крупные, хорошо зарекомендовавшие себя фирмы с сильными цепочками поставок должны получить больше, чем более мелкие компании, от любого возросшего спроса на онлайн-каналы.

Консультации для розничных продавцов

1. Если целью является обслуживание ваших постоянных клиентов, расширьте свой ассортимент за счет более нишевых продуктов.

Мои исследования показывают, что даже когда онлайн-ассортимент видео и музыки огромен и, таким образом, даже самые частые клиенты могут легко удовлетворить свои аппетиты продуктами из верхнего дециля, эти клиенты непропорционально активны в хвосте.Им нужен широкий ассортимент, поэтому предложение одного помогает привлечь и удержать их, независимо от того, платят ли они за продукт или за подписку (постоянные клиенты обычно выбирают более дорогие планы подписки).

2. Строго управляйте затратами на предложение продуктов, которые редко продаются. Если возможно, используйте онлайн-сети для создания творческих моделей, в которых вы не несете никаких затрат, если только покупатель не инициирует транзакцию.

Управление большим количеством продуктов, которые редко или никогда не продаются, легко может стать проблемой.Продукты с длинным хвостом могут предлагать розничным торговцам более привлекательную прибыль, чем популярные продукты, отчасти потому, что последние часто используются в качестве лидеров убытков. Но чрезвычайно низкий спрос на продукцию с длинным хвостом, вкупе со всеми затратами на то, чтобы сделать их доступными, затрудняет успешное выполнение модели с длинным хвостом.

Чтобы сделать «комбинезоны» и «двойки» прибыльными, может потребоваться полное устранение любых связанных с этим затрат. Поэтому стоит изучить творческие решения для самого конца хвоста.Одним из примеров является торговая площадка Amazon, в которой третьи стороны платят за то, чтобы сообщить о наличии названия, а Amazon несет расходы только тогда, когда покупатель действительно размещает заказ. Другой — волонтеры, которые создают, адаптируют и управляют информацией в веб-бизнесе. Только представьте, если бы Википедия платила авторам за каждую созданную страницу. Даже если бы плата была номинальной, Википедия, вероятно, потеряла бы значительную сумму на своих наименее посещаемых страницах.

3. Привлекайте клиентов и управляйте ими с помощью самых популярных продуктов.

Именно потому, что популярные продукты достигают наибольшего числа потребителей и ценятся больше всего, их ценность как лидеров потерь в традиционных каналах перейдет в цифровую сферу. Седьмая книга в серии о Гарри Поттере, представленная Scholastic по рекомендованной розничной цене в 34,99 доллара в США, оказалась лидером по убыткам блокбастеров: она была продана по резко сниженным ценам Barnes & Noble (20,99 доллара, скидка 40%) и Amazon (17,99 долларов США, скидка 49%), чтобы стимулировать другие покупки.

Подобно производителям, интернет-магазины могут получить выгоду от объединения популярных продуктов с малоизвестными или более старыми продуктами, которые дешевле приобрести. Другой, вероятно, более распространенный подход — направлять клиентов в хвост с помощью механизмов рекомендаций. Третья стратегия, которую стоит рассмотреть, — это проектирование потока веб-страниц таким образом, чтобы потребители, даже те, кто ищет популярные продукты, естественным образом направлялись в хвост. Списком рекомендуемых названий можно манипулировать — часто мгновенно и дешево — для выделения малоизвестных товаров с более высокой маржой или для сглаживания спроса на востребованные названия с течением времени.

4. Даже если малоизвестные продукты могут иметь более высокую прибыль, не поддавайтесь искушению слишком часто направлять клиентов в хвост, иначе вы рискуете их недовольство.

Очень важно найти хороший маркетинговый баланс между малоизвестными и популярными товарами. Интернет-магазины не могут ожидать, что их покупатели предпочтут товары с длинным хвостом хитам — на самом деле, скорее наоборот. Они должны учитывать это при управлении ожиданиями и удовлетворением клиентов, что, в конце концов, ведет к долгосрочной прибыльности.Продолжающееся доминирование популярных продуктов и естественная форма спроса предполагают, что попытки откормить хвост за счет более равномерного распределения потребления по названиям в любом случае могут оказаться бесплодными.

Кто будет процветать?

Несомненно, у сегодняшних потребителей есть преимущества, которых не было ни у одного из предыдущих поколений. Интернет-торговля избавилась от ограничений физического магазина; выбор теперь обширен и поддерживается богатой информацией. Фанат хип-хопа, только открывающий для себя лирические таланты Jay-Z, не должен ограничиваться его недавними хитами; она может последовать за ним до его первого альбома Reasonable Doubt (1996), который имел лишь скромные продажи, и она может легко перейти к Талибу Квели и другим менее известным современникам, некоторые из которых могут быть доступны только в цифровом формате. формат.

Крису Андерсону стратегические последствия цифровой среды кажутся очевидными. «Преуспевать будут компании, — заявляет он, — это те, которые выйдут из режима наименьшего общего знаменателя и выяснят, как занять ниши». Но мои исследования говорят об обратном. Хотя никто не оспаривает удлинение хвоста (очевидно, что каждый день доступны для покупки все более малоизвестные продукты), хвост, вероятно, будет чрезвычайно плоским и заполнен названиями, которые в основном отвлекают потребителей, чей аппетит к настоящим блокбастерам сохраняется. расти.Поэтому очень спорно, что на хвосте можно заработать много денег. В продажах как видео, так и записанной музыки — во многих отношениях идеальных продуктов для проверки теории «длинного хвоста» — мы видим, что хиты являются и, вероятно, останутся доминирующими. Это реальность, которая должна информировать розничных торговцев, поскольку они изо всех сил стараются предложить своим клиентам удовлетворительный ассортимент с минимальными затратами. И это неизбежный вызов для производителей. Компании, которые добьются успеха, больше всех способны извлекать выгоду из отдельных бестселлеров.

Насколько уместно это доказательство, можно также найти в литературе по менеджменту. В течение 2006 года компания Hyperion Books, издающая художественную и документальную литературу для взрослых, выпустила на рынок десятки оригинальных книг в твердом переплете. Для некоторых из них компания потратила большие средства на приобретение и маркетинг, надеясь на прибыль, которую могут обеспечить только блокбастеры. Одним из них был роман Митча Албома « For One More Day », который стал единственным бестселлером в твердом переплете 2006 года.